一、实验步骤如下：1、细胞准备（贴壁细胞）：将细胞传至共聚焦皿，并缓慢摇动至均匀，培养至80-90%。2、JC-1染色工作液配制：取50μL JC-1(200×)加入8mLPBS稀释JC-1，再加入2mL JC-1染色缓冲液(5×)，混匀后即为JC-1染色工作液。3、洗涤：弃去培养基，用PBS洗2-3次。4、染色：加入1mL JC-1染...
线粒体膜电位检测(JC-1)实验教程。#线粒体膜电位检测 #细胞凋亡 #实验室 #科研狗的日常 #信天翁GOONIE - RNA提取小能手于20240916发布在抖音,已经收获了39个喜欢,来抖音,记录美好生活!
JC-1染料(线粒体膜电位探针)MitoProbe JC-1 检测试剂盒 结果与发绿色荧光的膜电位较低的线粒体相比,活性线粒体显示出更亮的红色荧光信号。红/绿荧光信号比的变化可用于确定健康与去极化的线粒体。 激发/发射...
不同荧光颜色的转变反应线粒体膜电位的变化,常用红绿荧光的相对比例衡量线粒体去极化的比例。 二、实验步骤 (1) 收集细胞:细胞悬液转入离心管中,1000rpm离心5min收集细胞,弃上清。 (2) PBS洗涤细胞:加入3ml 4℃预冷的PBS完全重悬细胞,1000rpm离心5min,弃上清。沉淀震荡混匀。 (3) 细胞计数:移取10微升在血...
JC-1有单体和多聚体两种存在状态,在低浓度时以单体的形式存在,高浓度时以多聚体形式存在,两者的发射光谱不同,但均可在流式细胞仪绿色(FL-1)通道检测出绿色荧光,JC-1可透过正常细胞膜以单体状态聚集胞内,正常健康线粒体的膜电位(△)具有极性,JC-1依赖于△的极性被迅速摄入线粒体内,并因浓度增高而在线粒体...
JC-1线粒体膜电位荧光探针染色步骤(流式细胞仪法): 1. 于6-,12或24-孔板上进行细胞铺板,密度为5×105 cells/mL。37℃,5% CO2培养箱培养过夜。选择合适的化合物根据特定的步骤进行凋亡诱导。 注:进行凋亡诱导时的细胞密度建议不超过1×106 cells/mL,也可根据自己的细胞类型培养至合适的密度。
JC-1法检测线粒体膜电位,以及检测线粒体膜电位的操作步骤! 4、对于贴壁细胞: 注意:对于贴壁细胞,如果希望采用荧光分光光度计或流式细胞仪检测,应先收集细胞,重悬后参考悬浮细胞的检测方法。 吸除6 孔板培养液,根据具体实验如有必要可以用 PBS 或其它适当溶液洗涤细胞一次,加入 1ml 细胞培养液。细胞培养液中可以...
3. 装载完JC-1后用JC-1染色缓冲液洗涤时,使JC-1染色缓冲液保持4℃左右,此时的洗涤效果较好。 4. JC-1探针装载完并洗涤后尽量在30分钟内完成后续检测。在检测前需冰浴保存。 5. CCCP为线粒体电子传递链抑制剂,有毒,请注意小心防护。 6. PH的变化影响膜电位,保持平衡染液中PH的一致性。
通过测定JC-1的荧光强度比值,可以反映线粒体膜电位的高低。 具体实验步骤如下: 1.将细胞或组织块离心,去除上清液,用PBS洗涤一遍,离心。 2.将细胞或组织块加入含有1μM的JC-1的PBS缓冲液中,室温下孵育30分钟。 3.离心洗涤一遍,去除上清液。 4.将细胞或组织块加入含有PBS缓冲液的离心管中,用流式细胞仪或荧光...
染色步骤 使用JC-1进行线粒体膜电位检测的步骤通常包括细胞准备、JC-1染色、洗涤和荧光检测等几个环节。具体的步骤可能会根据实验条件和设备的不同而有所差异,但基本流程通常是: 细胞准备:将细胞铺板在多孔培养板上,然后在适宜的条件下培养过夜。 JC-1染色:取一定体积的细胞悬液,加入JC-1工作液,在适宜的温度和...