JC-1线粒体膜电位检测---流式细胞仪 一、实验简介 线粒体膜电位的下降是细胞凋亡早期的一个标志性事件。JC-1是一种理想的用于检测线粒体膜电位的荧光探针,可以检测细胞、组织或纯化的线粒体膜电位。其原理是,当线粒体膜电位较高时,JC-1聚集在线粒体基质中,形成聚合物,488nm激发时的最大发射波长为590nm,可以产生红色荧光,在流式上表现为...
5. 孵育探针:将装载探针的细胞继续培养,以便JC-1在线粒体内稳定聚集。 6. 上机检测:使用流式细胞仪对细胞进行检测,获取荧光信号。 三、流式细胞仪设置 - 激发波长Ex=488nm,以激发JC-1的绿色和红色荧光。 - 发射波长设置:FL1(Em=525±20nm)用于检测绿色荧光;FL2(Em=585±20nm)用于检测红色荧光。 四、F...
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JC1 是一种常用的荧光染料,可以用于检测线粒体膜电位。其原理主要基于 JC1 在低浓度和高浓度时的存在状态变化及其对应的荧光表现。 JC1 有单体和多聚体两种存在状态。在低浓度时,JC1 以单体存在,此时可以检测到绿色荧光。在流式检测中,通常使用 FL-1 通道(与 FITC 同通道)进行检测。而在高浓度时,JC1 以...
注意：染色后尽量在30-60 min内完成上机检测。B. 用荧光显微镜检测 悬浮细胞，遵循流式细胞仪的方案A1-6步骤，将步骤A6收集的细胞悬液放置于载玻片上，用盖玻片盖住细胞。选择合适的滤光片对细胞进行荧光显微镜分析。对于贴壁细胞：建议的方案如下所示：（1）以6孔板为例，每孔加入1 mL细胞培养基。其他培养器皿...
JC-1可透过正常细胞膜以单体状态聚集胞内,正常健康线粒体的膜电位(△ψ)具有极性,JC-1依赖于△ψ的极性被迅速摄入线粒体内,并因浓度增高而在线粒体内形成多聚体,多聚体发射光为红色荧光;可被流式细胞仪的红色(FL-2)通道检测到,而细胞发生凋亡时,线粒体跨膜电位被去极化,JC-1从线粒体内释放,红光强度...
Q:贴壁细胞能否直接用JC-1在6孔板染色后,再用胰酶消化下来上流式? A:不建议,贴壁细胞之间相互接触可能会导致细胞与染料接触不均一,对JC-1染料进入细胞造成影响,尤其是当细胞生长较为密集的时候。推荐消化细胞后再孵育JC-1。 Q:石蜡切片和冰冻切片可以做JC-1吗? A:不可以,JC-1实验的样本必须是活细胞。 Q:...
通过JC-1从红色荧光到绿色荧光的转变可以很容易地检测到细胞膜电位的下降,同时也可以用JC-1从红色荧光到绿色荧光的转变作为细胞凋亡早期的一个检测指标。 温馨提示: 如果您想要做流式细胞检测服务,那不妨找专业细胞实验家来聊聊吧~可为您提供全方位、定制化服务!
JC - 1 流式检测的对照设置如下:空白对照不染色,可判断染色是否成功、有无荧光淬灭及背景荧光干扰;阴性对照为未处理样本,用于确定处理方式是否使线粒体膜电位(MTP)发生改变;阳性对照采用功能性对照,确保染料信号变化能被正确解读,避免非特异性改变。合适的阳性对照处理方式有解偶联剂 FCCP、CCCP 和 V...
流式JC-1检测实验服务是指线粒体内膜两侧的电位差,它是细胞能量代谢的关键指标之一。...,如有意向请联系伊莱博生物科技(上海)有限公司