JC-1是一种荧光染料,可以用于测量线粒体膜电位的变化。在低膜电位时,JC-1以其单体形式存在,发射绿色荧光。而在高膜电位时,JC-1会形成聚集体,发射红色荧光。 流式细胞仪可以通过检测细胞中JC-1荧光的变化来测量细胞内线粒体膜电位的变化。通过此测量,可以判断细胞的线粒体功能的状态,如是否发生线粒体膜电位的...
(6) 上机检测:流式细胞仪使用激发波长Ex=488 nm,发射波长FL1(Em=525±20 nm);FL2(Em=585±20 nm),用Flow Jo软件分析结果。 三、实验结果展示
检测JC-1单体时激发光设置为488nm,发射光设置为530nm;检测JC-1聚合物时,激发光设置为529nm,发射光设置为590nm (4)注意点 稀释JC-1时要迅速,否则易聚集,不易溶解;建议用碧云天的JC-1线粒体膜电位检测试剂盒。
在高浓度时,JC-1以多聚体形式存在,可以检测到红光,通常用FL-2通道(与PE同通道)进行流式检测。由于JC-1浓度的变化,它在单体和多聚体之间形成一个可逆的转变过程。在正常细胞中,当膜电位正常时,JC-1通过线粒体膜极性进入线粒体内,并因浓度升高而形成发射红色荧光的多聚体。然而,在凋亡细胞中,线粒体跨膜电...
注意：染色后尽量在30-60 min内完成上机检测。B. 用荧光显微镜检测 悬浮细胞，遵循流式细胞仪的方案A1-6步骤，将步骤A6收集的细胞悬液放置于载玻片上，用盖玻片盖住细胞。选择合适的滤光片对细胞进行荧光显微镜分析。对于贴壁细胞：建议的方案如下所示：（1）以6孔板为例，每孔加入1 mL细胞培养基。其他培养器皿...
流式细胞实验之JC-1实操#实验室日常 #科研狗的日常 #生物实验室 #实验室 #技术分享 - 流式细胞马老师于20240125发布在抖音,已经收获了1279个喜欢,来抖音,记录美好生活!
JC-1可透过正常细胞膜以单体状态聚集胞内,正常健康线粒体的膜电位(△ψ)具有极性,JC-1依赖于△ψ的极性被迅速摄入线粒体内,并因浓度增高而在线粒体内形成多聚体,多聚体发射光为红色荧光;可被流式细胞仪的红色(FL-2)通道检测到,而细胞发生凋亡时,线粒体跨膜电位被去极化,JC-1从线粒体内释放,红光强度...
JC-1可透过正常细胞膜以单体状态聚集胞内,正常健康线粒体的膜电位(△ψ)具有极性,JC-1依赖于△ψ的极性被迅速摄入线粒体内,并因浓度增高而在线粒体内形成多聚体,多聚体发射光为红色荧光;可被流式细胞仪的红色(FL-2)通道检测到,而细胞发生凋亡时,线粒体跨膜电位被去极化,JC-1从线粒体内释放,红光强度...
JC-1是一种广泛用于检测线粒体膜电位(mitochondrial membrane potential) 的理想荧光探针。可以检测细胞、组织或纯化的线粒体膜电位。 MMP(Mitochondrial membrane potential)是线粒体膜电位,线粒体是动植物细胞生成ATP的主要地点,是促进细胞能量转换、参与细胞凋亡的重要细胞器。线粒体在产生能量时会将电化学势能储存...
JC-1在水相中容易形成聚集体，因此需要边振荡边加染料。未用完的染料不应再保存至-20℃，而应于37℃避光保存10分钟。随后，加入2ml PBS，以500g室温离心5分钟去除上清，再以0.3ml PBS重悬细胞，上机取样时，注意不要超过250至300细胞/秒。图1展示了HL-60细胞，其中(A)为正常细胞，(B)为去极化...