iPSC-NK细胞分化方案可以分为2D培养和3D培养两种,两种方式都需要通过诱导造血祖细胞(HPC)后获得NK细胞。 01. iPSC-NK 2D培养 在最早的一种方案中,Kauffman团队使用两步体外2D分化方案,将人PSCs与小鼠骨髓基质细胞共培养以促进造血分化,然后将分选的HPCs与第二步的基质细胞系和包括IL-15、IL-3、IL-7、SCF和Flt...
1.6 弃去细胞上清液,用1 mL mTeSR-plus(含10 µM Y-27632 )轻轻重悬 iPSC,然后将其转移到已包被好的12孔板中。摇动板以均匀分布细胞,最终细胞密度为1×10^5细胞/孔,静置,室温下放置10分钟。确保培养在4~5天内传代。 表2.不同培养容器的细胞接种密度,根据细胞的生长速度确定细胞数量 1.7 将12孔板放回3...
一般情况下,使用三倍体或四倍体的细胞可以增加重编程效率。 2.细胞培养 IPSC细胞的培养需要遵循干细胞培养的基本原则,如细胞密度控制、培养基成分调整等。通常情况下,IPSC细胞在培养皿中形成典型的“鼠婴式”小团块状,这些小团块称为胚体样结构(embryoid bodies, EBs),EBs可以通过不同的分化因子诱导分化为不同的...
以下是IPSC细胞培养方法的步骤: 1.获取成熟细胞:通过从患者的皮肤、血液或其他组织中获取成熟细胞,如成纤维细胞。 2.重编程细胞:使用特定的转录因子,例如Oct4、Sox2、Klf4和c-Myc等,将成熟细胞转化为IPSC细胞。 3.培养IPSC细胞:将转化的IPSC细胞培养在含有适宜培养基的培养皿中。培养基中应包含必需的营养物质、...
为此,义翘神州携手国典医药,在5月14日举办线上直播讲座,探讨iPSC培养和类器官疾病模型构建,欢迎大家免费报名参加。 讲座介绍 主题一:诱导性多能干细胞和类器官:转化医学研究高效平台 主讲嘉宾:应明耀教授,国典(北京)医药科技有限公司首席技术官、联合创始人 ...
Nature 发文:首次创新性地将多能干细胞(iPSC)产生的原始样巨噬细胞(iMac)与相同来源的大脑类器官共培养,可诱导类器官结构变化,使这些 iMac 具备小胶质细胞的特征,进一步揭示人类诱导多能干细胞衍生的小胶质细胞在大脑发育中的作用,也为神经疾病的治疗研究提供新思路[1]。
●3D 神经细胞培养: microBrain 3D 实验用 384 孔板来自 StemoniX 公司。孔板在常规环境条件下进行铺板处理。每孔包含单个均一尺寸的 8-9 周成熟的人 iPSC 来源的皮质神经球人源细胞球暴露在化合物中 24 小时,或如图所示。 ●钙流检测实验: 使用FLIPR 钙 6 ...
诱导多能干细胞（iPSC）在培养过程中分化主要有以下原因。一是培养环境的因素。如果培养体系中添加的生长...
简而言之，使用多能干细胞培养基在无饲养层和无血清条件下将iPSC 维持在 细胞基底膜包被的培养皿上。每天更换培养基。在常规 iPSC 培养过程中，细胞每 3-5 天使用干细胞解离试剂传代一次，并作为小聚集体接种。对于类器官的生成，使用了未显示自发分化迹象的低传代 iPSC。iPSC 诱导分化步骤：一、定形内胚层分化...
我们的目的是研究导致 NKH 的 GLDC 基因变异对人诱导多能干细胞 (iPSC) 分化为 iPSC 衍生星形胶质细胞过程中细胞健康的影响，并确定能够克服 GLDC 缺陷的可持续机制。我们开发了 GLDC27-FiPS4F-1 系并进行了代谢组学、mRNA 丰度和蛋白质分析。这项研究表明，尽管 GLDC27-FiPS4F-1 保持了亲代遗传图谱，但它...