通常IP-WB实验会以input(全细胞裂解液)作为阳性对照样品,以空白IP作为阴性对照样品,因此完整的IP-WB结果至少需包含3个泳道的WB显影结果(下图黑色实线框区域,泳道1-input,泳道2-IP,泳道3-IgG/control)。如果为了能够更全面详细的评估IP的实验结果,还可以将IP实验抗体孵育后的上清液也作为阴性对照进行WB检测(泳道4-I...
#wb #IP #电泳 #实验 考马斯亮蓝染色操作步骤,整个染色过程在1小时内完成哦! - 菲恩生物于20220513发布在抖音,已经收获了24.7万个喜欢,来抖音,记录美好生活!
实验中确定一抗,二抗的方法有多种途径,看文献,查专业抗体网站,或者问你同事你领导你导师,再不行直接问医药公司的销售和技术支持人员,总有一个渠道可以帮助你确定你需要的抗体。 但是和抗体有关的入门知识你也必须要了解:比如什么是一抗、什么是二抗、一抗二抗选择的标准是什么,WB、IHC、ICC、FC、IP等实验的抗体...
Western blot二抗的选择 二抗能够识别Westernblot检测中IP样品的一抗重链和轻链并且会得到两条带(50kDa的重链和25kDa的轻链)。因此,当目的蛋白质在50kDa或25kDa周围时,就很难被检测到。 为避免抗体的轻重链的干扰,推荐使用Rockland T...
因此在做IHC/IF实验中,最合适是用重组蛋白作为抗原制备出来的抗体,除此之外也可以是人工合成多肽作为抗原制备出来的抗体。如果所用的抗体识别的是线性表位(例如识别蛋白上连续的几个氨基酸)那么这种抗体则可以同时用于IHC和WB,而如果抗体识别的是构象表位,则只能用于IHC。IP/CHIP IP(Immunoprecipitation,免疫沉淀):...
在免疫沉淀实验后的WB验证环节中,当使用常规的 Anti-IgG (H+L)酶标二抗时,通常会出现对应免疫沉淀一抗变性后产生的重链(50kDa)和轻链(25kDa)两条带。如果检测的目的蛋白分子量在此附近时,就会受到这两条带的干扰。 如何避免IP检测过程中的重、轻链干扰?
WBIP实验样品制备技巧大部分匀浆仪产生的颗粒较大然而一些带特殊旋转刀片的匀浆仪可以切割产生小到4微米且一致的颗粒这种破碎对于一些小的单细胞样本如细菌酵母效果不明显但是对于大块的骨质的纤维较多的样本特别适用 WBIP实验样品制备技巧 在WB 和 IP实验中,破碎细胞或组织与选择和配制裂解液一样重要。 比起一些更软...
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IPKine是一系列新型的二抗产品,能有效解决IP-WB后的轻/重链干扰问题。IPKine系列二抗经过特别优化,不会与IgG的轻/重链分子结合,只识别IgG分子的重/轻链部分,从而能有效解决IP实验后的WB检测中面临的轻/重链干扰信号降到最低。 另外,IPKine系列二抗经过特别优化,其针对目的种属的特异性非常高,同时针对其他非目的种属...
Co-IP实验结果解读,IP前后WB如何。一文搞定Co-IP结果解读~ Co-IP、IP、WB实验控制,如何做?如何解? #科普 #实验 #生物 #实验室 #青少年课外知识讲堂 - 生科学姐于20240507发布在抖音,已经收获了7个喜欢,来抖音,记录美好生活!