IP/Co-IP实验中IgG阴性对照的意义是什么? 排除非特异性结合的可能性,例如检测一个兔子细胞的某种蛋白质,若没有设置IgG的对照,而操作中有非特异性蛋白质,又和设计的抗体有作用,就会出现阳性的结果。如果做了lgG阴性对照,对照没有出现阳性就说明没有非特异性的蛋白,对照出现阳性,说明抗体有非特异结合到杂蛋白的...
)阴性对照组:看不到B蛋白的Western条带 或者 条带较弱。 (因为IgG并不能特异性的与任何蛋白结合,那么IgG所带下来的蛋白都是非特异性的与IgG结合的蛋白,得到的东西就是背景。)简言之:anti-A的抗体由特异性的识别A蛋白的Fab片段和IgG片段组成。但是anti-A抗体有可能有非特异性结合,这些就是背景。而IgG的阴性...
本实验一共分为两大组：Input组及IP组，其中IP组又分为IgG组（阴性对照组）和实验组，并通过WB去验证蛋白A和B在每一个组里面是否存在。由Input组的条带可以得到结论：蛋白A与蛋白B都是存在的，证明样本处理提取蛋白的步骤没有任何问题。阴性对照IgG组和实验组平行进行免疫沉淀实验，结果蛋白A与蛋白B均没有条带...