IP/Co-IP实验中IgG阴性对照的意义是什么? 排除非特异性结合的可能性,例如检测一个兔子细胞的某种蛋白质,若没有设置IgG的对照,而操作中有非特异性蛋白质,又和设计的抗体有作用,就会出现阳性的结果。如果做了lgG阴性对照,对照没有出现阳性就说明没有非特异性的蛋白,对照出现阳性,说明抗体有非特异结合到杂蛋白的...
实验组：加入anti-A的抗体………最后用Western检验B蛋白。对照组（阴性对照）：加入IgG………最后用West...
根据结果图信息，首先从最左边的一列可以知道该结果是探讨BRD9和FOXP1之间是否存在相互作用；并且二者都没有带标签，因此IB检测直接用针对目的蛋白的抗体；然后Input组为阳性对照，IgG为IP组的阴性对照，anti-FOXP1是IP的实验组，即表示分别用IgG和FOXP1的抗体进行WB检测蛋白复合物。结果显示，Iuput组中均检测到了B...
Input:阳性对照组,组织细胞裂解液,在做 IP 实验之前,需要先跑 WB,确认样本中含有蛋白 A 和蛋白 B; IgG:阴性对照组,Anti-X 的同型对照抗体,如 Anti-X 是兔 IgG 型,则同型对照抗体需要选择 Rabbit IgG ; IP:实验组,免疫沉淀(immunoprecipitation),富集目的蛋白; Anti-X:X 蛋白的免疫共沉淀抗体; IB:免疫...
为了排除非特异性结合的影响，我们需要引入IgG对照。通过将IgG与目标蛋白质一同进行共免疫沉淀，我们可以确定实验条件下非特异性结合的程度。通过对比目标蛋白质与IgG的共沉淀情况，我们可以准确判断目标蛋白质与其他蛋白质的特异性相互作用。六、IgG对照的作用 在co-ip-ms实验中，引入IgG对照可以起到以下几个作用：1....
IP 指的是使用这个蛋白的抗体来包被 beads,IB 指使用某抗体去检测沉淀下来的蛋白 这里的 IgG 就是做阴性对照用 影响Co-IP 结果成败的其它因素: 除了以上这些在实验设计时需要注意的,蛋白样品的表达,抽提,Co-IP 的 wash 和洗脱步骤也是相当重要的。
IP：全称immunoprecipitation，即免疫沉淀，这一步主要是为了纯化富集目的蛋白。Input：全细胞裂解液，含有细胞内所有的蛋白，可认为是阳性组。也就是处理完样本得到的细胞裂解液，在做IP实验之前，需要先跑WB，确认样本中含有蛋白A和蛋白B。Anti-A：A蛋白的免疫共沉淀抗体 IgG：Anti-A的同型对照抗体，即跟Anti-A同...
在co-ip-ms实验中,引入IgG对照可以起到以下几个作用: 1.评估非特异性结合程度 通过将IgG与目标蛋白质一同进行共免疫沉淀,我们可以确定实验条件下非特异性结合的程度。如果在实验中观察到与IgG的共沉淀,而与目标蛋白质无关的其他蛋白质,那么可以推断这些共沉淀物是由于非特异性结合而产生的。这样,我们就可以准确判...
在co-ip-ms实验中,IgG对照是一种常用的实验对照。IgG是一种免疫球蛋白,与目标蛋白质无特异性结合。因此,将IgG作为对照可以帮助我们判断实验结果是否受到非特异性结合的影响。 五、为什么需要IgG对照? 在co-ip-ms实验中,我们常常需要确定目标蛋白质与其他蛋白质的特异性相互作用。然而,由于实验条件的复杂性和蛋白质...