由于Pull-down实验条件是体外状态而非体内自然状态，无法得知体内真实的蛋白结合情况，因而可能会使实验结果出现假阳性，例如可能是因为电荷作用的影响造成的吸附而不是生理性的相互作用。同时，Pull-down也可以对Co-IP实验鉴定到的蛋白相互作用关系做进一步验证。若将Co-IP/Pull-down技术与以LC-MS为基础的蛋白质组学...
该实验使用 GST-Pnsll 作为诱饵蛋白进行 Pull-down 实验,His-Pelo 则作为目的蛋白; 此时Anti-GST、Anti-His 代表分别以 Anti-GST 抗体和 Anti-His 抗体对 Pull-down 处理后的样本进行 WB 检测,条带4处的空白表示 GST 不会与 His-Pelo 结合,而条带3、11则表示沉淀中同时存在 GST-Pnsll 和 His-Pelo,说明...
Pull-down 技术又称蛋白质体外结合实验(Binding assay in vitro), 是一种行之有效的验证酵母双杂交系统的体外试验技术,可用于初步研究两种蛋白质互作分析。 Co-IP和Pull-down 均可用于检测蛋白相互作用,两者有很多相似之处,包括均能检测两种蛋白质之间强相互作用,但均只能进行定性分析而不能检测瞬时相互作用,同时Co...
Pull down实验又称拉下实验,是一种体外亲和纯化技术,蛋白Pull down技术可以提供一种诱饵蛋白来特异性识别配体蛋白质,以达到富集、分离、纯化某种配体蛋白质的目的,是体外研究蛋白与蛋白相互作用的有力工具。诱饵蛋白的实质是被亲和试剂标签(如谷胱甘肽-S-转移酶、组氨酸六肽、生物素)标记的已知蛋白。现又衍生了一种DN...
接下来,为了确定ABHD11-AS1促进肺癌发生和进展的潜在机制,进行RNA pulldown-Mass实验(图1a)。5个候选分子的RNA pulldown-WB验证结果显示,SART3在实验组和阴性对照组差异最大(图1b)。SART3敲低显著降低细胞干性(图1c-d),表明ABHD11-AS1与SART3的相互作用可能在肺癌的发生发展中起重要作用。
由于Pull-down实验条件是体外状态而非体内自然状态，无法得知体内真实的蛋白结合情况，因而可能会使实验结果出现假阳性，例如可能是因为电荷作用的影响造成的吸附而不是生理性的相互作用。同时，Pull-down也可以对Co-IP实验鉴定到的蛋白相互作用关系做进一步验证。若将Co-IP/Pull-down技术与以LC-MS为基础的蛋白质组学...
Pull-down: 该实验使用 GST-Pnsll 作为诱饵蛋白进行 Pull-down 实验,His-Pelo 则作为目的蛋白; 此时Anti-GST、Anti-His 代表分别以 Anti-GST 抗体和 Anti-His 抗体对 Pull-down 处理后的样本进行 WB 检测,条带4处的空白表示 GST 不会与 His-Pelo 结合,而条带3、11则表示沉淀中同时存在 GST-Pnsll 和 ...
Pull-down: 该实验使用 GST-Pnsll 作为诱饵蛋白进行 Pull-down 实验,His-Pelo 则作为目的蛋白; 此时Anti-GST、Anti-His 代表分别以 Anti-GST 抗体和 Anti-His 抗体对 Pull-down 处理后的样本进行 WB 检测,条带4处的空白表示 GST 不会与 His-Pelo 结合,而条带3、11则表示沉淀中同时存在 GST-Pnsll 和 ...