免疫荧光(IF)是二抗偶联荧光基团经过激发显色; 免疫细胞化学(ICC)通过化学反应显色; 免疫荧光(IF)利用荧光标记的抗体作为探针对组织或细胞内特定抗原进行定位和定性分析;由于特异性强、敏感性高、速度快,广泛用于科学研究。 免疫荧光(IF)的检测方法主要包括直接免疫荧光和间接免疫荧光。 免疫细胞化学 (ICC)通过使用抗...
要实现可靠一致的实验结果,对操作流程的优化必不可少。IHC/ICC/IF的原理和实验步骤大体相同,整体实验流程如下图所示。IHC、ICC、IF实验虽然原理简单,但却是很多研究僧漫漫毕业路上的绊脚石。贴心的研小编在此奉上一份超级全面的troubleshooting guide,希望能...
免疫荧光(IF)的检测方法主要包括直接免疫荧光和间接免疫荧光。 免疫细胞化学 (ICC)通过使用抗原抗体特异性结合反应,提供了一种半定量的方法来分析靶抗原的相对丰度、构象和亚细胞定位。 因为ICC/IF的原理和实验步骤大致相同,所以常常把 ICC/IF放在一起使用。 二、实验步骤拆解 标准的ICC/IF实验方案包括: 样本制备→...
一、IF、ICC原理解析 二、标准的ICC/IF实验步骤 Step1:样本制备 Step2:染色步骤 Step3:封片、观察 三、常见问题分析 1、二抗怎么选? 2、荧光信号有问题怎么办? 3、高背景怎么办? 4、其它高频问题汇总 推荐内容 因为原理相似,实验新手在面对IF、ICC、IHC、mIHC这几种技术时总是傻傻分不清! 如何区分IF、ICC、...
因为ICC/IF的原理和实验步骤大致相同,所以常常把 ICC/IF放在一起使用。 二、标准的ICC/IF实验步骤 样本制备→染色前的固定/透化/封闭/→抗体孵育→复染&显微镜成像 Step1:样本制备 ①样本前处理:细胞爬片 ◆洗涤:弃去培养基,在细胞上缓慢加入常温PBS清洗2次,每次5分钟; ...
直接IF使用直接与荧光染料偶联的单一抗体来检测感兴趣的靶标。间接IF使用两种抗体来检测感兴趣的目标。结合靶标的一抗是未偶联的,与一抗反应的二抗与荧光染料偶联。 每种检测方式的优缺点是什么? 免疫细胞化学(ICC) 免疫细胞化学最常用于在培养皿中单层生长或从悬浮液转移...
直接IF使用带有荧光染料的一抗,而间接IF则使用与靶标结合的一抗和与一抗结合的荧光染料偶联的二抗。 IHC (Immunohistochemistry) - 通常使用冷冻或石蜡包埋的全组织切片样本。例如,IHC-P表示石蜡切片的免疫组织化学,而IHC-Fr表示冰冻切片的免疫组织化学。 ICC (Immunocytochemistry) - 主要应用于分离或培养获得的细胞...
免疫组织化学(IHC)、免疫细胞化学(ICC)和免疫荧光(IF)是生物学研究中经常用到的三种应用,IHC的样本类型是组织,ICC的样本类型是细胞,而IF指的是在实验中使用了荧光标记。 IHC&ICC实验大致分为样品制备(固定、脱蜡)、抗原修复(表位/抗原修复/还原)、封闭、抗体检测、显色、复染、封片等7个步骤;若与IF结合,则分...
免疫组织化学（IHC）和免疫细胞化学（ICC）是两种定位抗原表达的关键技术，依赖于抗原抗体间的特异性结合。IHC通常应用于组织切片，通过固定、封闭、一抗和二抗孵育，显微镜下观察标记结果。而ICC则针对培养细胞，同样使用荧光或染料标记。IHC-P特指石蜡切片免疫组化，适用于组织样本；IHC-Fr则针对冰冻切片，...
免疫荧光(Immunofluorescence,IF)、免疫组化(Immunohistochemistry,IHC)和免疫细胞化学(Immunocytochemistry ,ICC)都是极为常用的免疫检测技术,它们都基于抗原与抗体之间特异性结合的基本原理,通过标记物来对目标抗原进行检测和分析。尽管有相同之处,但在具体技术细节、样本处理以及应用方向上,三者存在着明显的差异。