要实现可靠一致的实验结果,对操作流程的优化必不可少。IHC/ICC/IF的原理和实验步骤大体相同,整体实验流程如下图所示。IHC、ICC、IF实验虽然原理简单,但却是很多研究僧漫漫毕业路上的绊脚石。贴心的研小编在此奉上一份超级全面的troubleshooting guide,希望能...
免疫组织化学(IHC) 免疫组织化学最常对组织样本进行,这些样本要么冷冻在冻存介质中,例如最佳切割温度(OCT)化合物,要么固定在中性福尔马林中并包埋在石蜡中。免疫组织化学使您可以在组织样本中观察您感兴趣的靶标,同时保持细胞结构。 免疫组织化学-冰冻组织(IHC-F) 为显微实...
免疫荧光(IF)是二抗偶联荧光基团经过激发显色; 免疫细胞化学(ICC)通过化学反应显色; 免疫荧光(IF)利用荧光标记的抗体作为探针对组织或细胞内特定抗原进行定位和定性分析;由于特异性强、敏感性高、速度快,广泛用于科学研究。 免疫荧光(IF)的检测方法主要包括直接免疫荧光和间接免疫荧光。 免疫细胞化学 (ICC)通过使用抗...
什么是免疫组化(IHC),免疫细胞(ICC),免疫荧光(IF)? 免疫组化,是应用免疫学基本原理——抗原抗体反应,即抗原与抗体特异性结合的原理,通过化学反应使标记抗体的显色剂(荧光素、酶、金属离子、同位素)显色来确定组织细胞内抗原(多肽和蛋白质),对其进行定位、定性及相对定量的研究,称为免疫组织化学技术(immunohistochem...
免疫荧光(Immunofluorescence,IF)、免疫组化(Immunohistochemistry,IHC)和免疫细胞化学(Immunocytochemistry ,ICC)都是极为常用的免疫检测技术,它们都基于抗原与抗体之间特异性结合的基本原理,通过标记物来对目标抗原进行检测和分析。尽管有相同之处,但在具体技术细节、样本处理以及应用方向上,三者存在着明显的差异。
IF:具有较高的分辨率和灵敏度,能够清晰地显示抗原在细胞内的精细结构。 ICC:分辨率适中,适用于观察单个细胞或细胞群中的抗原表达。 IHC:虽然分辨率相对较低,但在组织水平上能够提供丰富的信息,有助于了解抗原在组织中的分布和功能。 定量与定性分析 IF:可以进行一定程度的定量分析,如通过测量荧光强度来判断抗原的表达...
因为ICC/IF的原理和实验步骤大致相同,所以常常把 ICC/IF放在一起使用。 二、标准的ICC/IF实验步骤 样本制备→染色前的固定/透化/封闭/→抗体孵育→复染&显微镜成像 Step1:样本制备 ①样本前处理:细胞爬片 ◆洗涤:弃去培养基,在细胞上缓慢加入常温PBS清洗2次,每次5分钟; ...
免疫组化：常用于临床病理诊断、蛋白质表达研究等领域。免疫细胞化学：适用于细胞生物学研究，特别是细胞内蛋白质的定位和动态变化研究。免疫荧光：因其特异性和高敏感性，在细胞水平分析中更常用，如亚细胞结构研究、蛋白质相互作用研究等。综上所述，IHC、ICC和IF在样本类型、标记方法和应用领域上各有...
免疫荧光（IF）是IHC和ICC的增强版，它使用荧光标记，可以实现多目标蛋白的共定位分析，尤其适合亚细胞级别的研究。IF技术根据标记物的不同，可以分为直接法和间接法，前者直接加标记抗体，后者则先用未标记抗体与样本反应，再加荧光标记的抗体。在选择这些技术时，要考虑样本类型（组织或细胞）、特异性、...
免疫荧光(Immunofluorescence,IF)、免疫组化(Immunohistochemistry,IHC)和免疫细胞化学(Immunocytochemistry ,ICC)都是极为常用的免疫检测技术,它们都基于抗原与抗体之间特异性结合的基本原理,通过标记物来对目标抗原进行检测和分析。尽管有相同之处,但在具体技术细节、样本处理以及应用方向上,三者存在着明显的差异。