一、实验原理 免疫荧光(Immunofluorescence,IF)技术是集免疫学、生物化学和显微镜技术于一身的一项常用的免疫标记技术。将荧光物质(最常用的是荧光素)标记于抗原或抗体上,当其与相应抗体或抗原结合后,就会…
1. 抗体与抗原的结合:IF技术利用特异性抗体与抗原之间的相互作用。抗体是一种免疫球蛋白,能够与特定的抗原结合;在IF技术中,抗体被标记上荧光染料,使其能够通过荧光显微镜进行观察。2. 荧光标记:在IF技术中,抗体通常被标记上荧光染料,如FITC(异硫氰酸荧光素)、Rhodamine、Cy3(三嗪)等;这些荧光染料在特定...
免疫荧光中的封闭和抗体孵育与其它方法(如ELISA或Western Blot)中的相同步骤是类似的,最重要的区别在于免疫荧光实验中要用到荧光抗体,因此必须谨记避光操作,此外抗体浓度的选择可能更加关键。最后需要注意的是,标记好荧光的细胞片应尽早观察,或者用封片剂封片后在4℃或-20℃避光保存,以免因标记蛋白解离或荧光减弱而影响...
8.弃 PBS,加入1/0.5/0.25 ml/孔稀释的荧光二抗,室温避光孵育 40 min,摇床轻摇。 9.回收荧光二抗,PBS润洗 3 次,每次 5 min,摇床轻摇。 10.滴加 DAPI(200/100/50ul/孔)避光孵育5 min,PBS 润洗 4 次,每次 5 min,洗去多余的 DAPI。 用滤纸吸干爬片上的液体,滴1滴抗荧光猝灭封片液于载玻片上,盖上贴...
免疫荧光(IF) 免疫荧光(IF)是指所使用的检测方法(即使用荧光染料使感兴趣的标记可视化),与所使用的样本类型无关。IF可以进一步分为两类:直接法和间接法。 直接IF使用直接与荧光染料偶联的单一抗体来检测感兴趣的靶标。间接IF使用两种抗体来检测感兴趣的目标。结合靶标的一...
免疫荧光(ICC/IF) 免疫荧光概述 五步法固定细胞成像 固定细胞成像产品选择指南 免疫荧光实验手册及资源 免疫荧光概述 我们在细胞成像领域深耕近50年,可为您提供值得信赖的研究工具和方案,帮助您首次实验即可获取高品质的细胞图像。Invitrogen™成像试剂和抗体...
免疫细胞化学/免疫荧光 (ICC/IF) 是一种使用荧光抗体或染料来检测细胞内靶抗原的技术。本实验方案详述了使用 Cytospin™ 离心对悬浮细胞进行 ICC/IF 的流程。一般流程 1. 用聚乙烯亚胺或多聚赖氨酸涂覆盖玻片,在室温下放置 1 小时。2. 用无菌水充分漂洗盖玻片 3 次,每次 1 小时。3. 充分干燥盖玻...
免疫荧光(IF)检测服务 免疫荧光技术(Immunofluorescence technique )是在免疫学、生物化学和荧光成像系统基础上建立起来的检测技术。技术原理是根据抗体-抗原特异结合,以荧光标记抗体示踪组织或细胞内相应抗原。免疫荧光技术因特异性强、灵敏度高和操作简便的优势广泛应用于免疫学、微生物学、病理学、肿瘤学以及临床检验等...
免疫荧光(IF)技术,简称免疫荧光,是一种通过荧光素标记已知抗体或抗原来检测组织或细胞样本中靶抗原或抗体的方法。其原理基于抗原-抗体反应的高度特异性。在反应过程中,抗原抗体复合物上会携带荧光素,进而在荧光显微镜下发出明亮荧光,从而实现对目标抗原或抗体的精准定位、性质判断以及定量分析。这种技术广泛应用于...
作为同一分组的重复)用指甲油将爬片沿周覆盖(指甲油可换封片液),使爬片固定在载玻片上,将载玻片放置在阴凉处风干,将玻片放在激光共聚焦进行检测(也可用荧光显微镜观察,拍照)一抗蛋白表达在细胞膜上与空白细胞组相比,转染组此细胞的一抗蛋白表达明显增加 自此,IF实验完成!#广州华韵生物科技有限公司# ...