中国科学院武汉病毒研究所罗敏华教授团队先后对HSV-1 H129株进行改造开发了一系列顺行跨单级突触的示踪...
HSV-1型H129株具有特异顺向跨突触的特性。病毒感染神经细胞后，在胞内复制并表达目的基因，子代病毒经...
罗敏华课题组首先对HSV-1 H129株进行改造,开发了携带2x GFP和2x mGFP的高亮度的顺向跨多级示踪工具H129-G4。H129-G4荧光强度高,可展示神经元树突棘等细节,为首个与fMOST联用的顺向示踪工具。在该病毒改造平台基础上,团队开发并首...
选用Ⅰ型HSV的H129毒株,在其基因组中插入四个GFP基因获得重组病毒H129-G4。在小鼠初级运动皮层(M1)注射该病毒,4天后观察结果如图2所示:发现H129-G4能够标记MI下游多级投射神经元,且神经元细微结构清晰, 荧光信号亮度高,满足了fMOST成像要求。 图2:H129-G4...
HSV-1 H129株是一株具有独特顺向跨突触传播特性的I型单纯疱疹病毒临床分离株,作为载体在神经环路示踪领域等有着广泛应用。然而,传统分子生物学手段难以实现对HSV-1在全基因组水平的编辑,限制了其进一步应用。研究团队以神经示踪病毒H129-G4为模板,在酵母中合成了带绿色荧光基因的病毒全基因组,将其转染哺乳动物细胞...
1.一种减毒增亮、复制可控的HSV重组病毒,其制备方法包括: (1)同源臂克隆及靶向质粒构建 抽提纯化HSV-1 H129病毒基因组DNA,以其为模板,克隆TK基因上游同源臂序列1465bp,所用引物为UHAS-F:5' GCTAGCAGTGGGCCAAAAAGCCTAGC 3';UHAS-R:5'AAGCTTACGCACGGGTGTTGGGTCGTTTG 3';克隆下游同源臂序列1476bp,所用引...
[0011] HSV-1H129毒株为脑炎病人临床分离株,具有严格顺向跨突触传播的特性。但野生 型病毒毒力强,小鼠中枢感染H129后一般只能存活3-5天,不利于开展神经环路示踪及功能 活动等研究。为构建减毒、复制可控、灵活携带外源基因的H129重组病毒,设计将病毒UL23 基因编码的胸苷激酶(thymidine kinase,TK)敲除。TK是HSV感染...
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