HSV-1-H129-dTK-T2是HSV-1-H129-△TK-tdT的改进版,增加了tdTomato荧光强度,并优化了生产工艺,是一种优良的顺行跨单突触示踪工具病毒。H129-dgK-G4(图2):gk在病毒进出细胞及与细胞融合过程中发挥重要作用,gk缺失会严重影响病毒在神经元间的传播,在表达gk的辅助病毒(AAV helper)存在下,H129-dgK-G4可以进...
HSV-1-H129-dTK-T2是HSV-1-H129-△TK-tdT的改进版,增加了tdTomato荧光强度,并优化了生产工艺,是一种优良的顺行跨单突触示踪工具病毒。 PMID: 33367996 H129-dgK-G4 以HSV-1 H129 糖蛋白K(gk)为敲除靶点,开发的一种新型顺行跨单级示踪病毒。gk在病毒进出细胞及与细胞融合过程中发挥重要作用,gk缺失会...
罗敏华课题组首先对HSV-1 H129株进行改造,开发了携带2xGFP和2xmGFP的高亮度的顺向跨多级示踪工具H129-G4。H129-G4荧光强度高,可展示神经元树突棘等细节,为首个与fMOST联用的顺向示踪工具。在该病毒改造平台基础上,团队开发并首次报...
单纯疱疹病毒(Herpes simplex virus,HSV)属于疱疹病毒科、α疱疹病毒亚科,有HSV-1和HSV-2两种亚型。HSV感染宿主范围广,能有效感染啮齿类动物和灵长类动物等。H129是HSV-1型病毒的临床分离株,经过多年在各种动物模型的活体测试,发现其在外周神经系统以及中枢神经系统都具有严格顺向跨突触的特性。经过改造的病毒,装入...
内容提示: 分类号 学号 M201675955 学校代码 10487 密级 硕士学位论文 嗜神经性疱疹病毒 HSV-1 H129 经眼压感受性三叉神经末梢感染下丘脑 学位申请人:张志丹 学科专业 :眼科学 指导教师 :刘海霞 答辩日期 :2019 年 05 月 万方数据 文档格式:PDF | 页数:47 | 浏览次数:35 | 上传日期:2020-01-25 16:33:...
近日,病毒学国家重点实验室罗敏华课题组在《Nature Communications》发表了题为“An HSV-1-H129 amplicon tracer system for rapid and efficient monosynaptic anterograde neural circuit tracing”的研究论文。该研究基于HSV-1 H129扩增子与H129-dTK-T2进行多轮病毒遗传改造,研发出标记亮度高、实验周期短(5天)、操作...
通过在H129基因组中敲除TK基因构建H129-△TK-tdT,并构建AAV-TK-GFP。在小鼠VPM脑区先后在同一位点注射AAV-TK-GFP 和H129-△TK-tdT,结果如图4所示,清晰标记出了VPM区神经元直接投射的下一级神经元。 图4:H129-△TK-tdT顺向跨单级示踪VPM投射环路。
HSV-1 H129株是一株具有独特顺向跨突触传播特性的I型单纯疱疹病毒临床分离株,作为载体在神经环路示踪领域等有着广泛应用。然而,传统分子生物学手段难以实现对HSV-1在全基因组水平的编辑,限制了其进一步应用。研究团队以神经示踪病毒H129-G4为模板,在酵母中合成了带绿色荧光基因的病毒全基因组,将其转染哺乳动物细胞...
例如,基于H129-BAC的遗传改造平台,可以缺失病毒的Tk基因,使之在vero细胞内 正常增殖,同时无法在神经元内传播;进而通过AAV辅助病毒系统补偿Tk,可实现跨一级突 触传播,应用于示踪神经环路,病毒扩增容易。[0038] 优选的,如上所述的I型单纯疱疹病毒H129-BAC的变体病毒的构建方法,在步骤1) 中:[0039]当目的变体...
HSV-ΔTK-hUbC-tdTomato是在HSV-tdTomato(HSV 1型毒株H129基因组整合一个tdTomato 基因)的基础上敲除胸苷激酶(thymidine kinase, TK)基因而获得。因为TK基因的敲除,HSV-ΔTK-hUbC-tdTomato 的体内跨突触传播能力受到限制。在表达TK的辅助病毒的存在下,HSV-ΔTK-hUbC-tdTomato可以从起始神经元传播至突触后的神...