目的 建立HIV-1 DNA的实时荧光定量聚合酶链反应(real-time PCR)检测方法.方法 根据HIV-1 NL4-3 LTR基因及人CCR5基因序列设计引物,构建质粒标准品,建立绝对定量检测方法,对检测方法的重复性和特异性进行评价.用该方法对20例HIV-1感染者HIV-1 DNA进行定量检测.结果 构建了HIV-1 DNA绝对定量的标准品质粒,标准...
“双重定量”技术了解一下,也就是大家经常在知识局平台常看到的,干血斑HIV-1 DNA定量检测技术,不同于纯粹的定性检测。 “双重定量”全称是“双重实时荧光定量PCR”,是在“实时荧光定量PCR(real-time PCR)”的基础上发展起来的一种更为快捷方...
实时荧光定量PCR扩增的实验检测过程可分为:(1)样品制备,抽提和浓缩目标RNA分子,并除去可能存在的抑制因子。(2)Real-time PCR,检测PCR的产物使用荧光标记的寡核苷酸探针。检测的原理基于荧光信号增长曲线与循环数相关。(3)RT-PCR反应,病毒RNA利用逆转录酶...
实时荧光定量PCR扩增的实验检测过程可分为:(1)样品制备,抽提和浓缩目标RNA分子,并除去可能存在的抑制因子。(2)Real-time PCR,检测PCR的产物使用荧光标记的寡核苷酸探针。检测的原理基于荧光信号增长曲线与循环数相关。(3)RT-PCR反应,病毒RNA利用逆转录酶将RNA逆转录为cDNA,然后通过DNA聚合酶对特定片段进行扩增。(4)...
目前国际上常用的病毒载量检测方法主要有分支DNA杂交(Branched DNA ,bDNA)、核酸序列扩增(Nucleic Acid Sequence Based amplification,NASBA)方法及实时聚合酶链反应(Real time Polymerase chainreation,实时-PCR)。分支DNA杂交(Branched DNA ,bDNA)基于其独特的信号放大系统,即分枝DNA信号放大系统,这是一个人工合成的...
③针对病毒分离株本身(DNA/RNA)的实时聚合酶链式反应(real-time polymerase chain reaction, RT-PCR)检测 六,HIV感染的临床分期诊断 根据HIV感染的自然病程和临床特征,HIV感染者可分做三期。 1,急性期 通常发生感染HIV 的 6 个月内。在这期间,感染者可能有两类表现: ...
常用方法有反转录PCR（RT-PCR）、核酸序列依赖性扩增（NASBANuclisens）、分枝DNA信号放大系统（bDNA）和实时荧光定量PCR扩增（realtime PCR）。病毒载量测定的临床意义包括预测疾病进程、提供开始抗病毒治疗依据、评估治疗效果、指导治疗方案调整以及HIV感染早期诊断的参考指标。小于18月龄的婴幼儿HIV感染诊断可以采用核酸...
利用SYBR GREEN荧光特性和实时聚合酶连锁反应技术(REAL-TIME PCR)检测HLA-B*5701基因,试剂盒内包含一组HLA-B*5701基因型专一之引物,为了分辨PCR。 抑制可能造成的伪阴性结果,搭配一组内部控制组基因引物(IN-TERNAL CONTROL, IC)。 每一个样本必须要同时测试两个独立的PCR反应,当样本中带有HL A-B*5701基因时,具...
包2-病毒载量试剂(雅培)Abbott雅培RealTimeHIV-1病毒载量检测试剂技术规格1.检测项目:HIV-1病毒载量检测1.1检测亚型:HIV-1型M组(A-H)、O组、N组1.2检测方法:应用RT-PCR和Real-time实时荧光定量检测技术HIV-1型各组病毒载量1.3检测平台:m2000sp或m24sp自动核酸提取仪或手工核酸提取,m2000rt实时荧光定量PCR仪2...