HIS-Tag由6-10个组氨酸残基组成,分子量不到0.84KD,,通常插入在目的蛋白的C末端或N末端。HIS-Tag是目前原核表达最常用的标签,蛋白纯化完之后可以不需切除此标签,也不会对蛋白产生功能影响。同时,蛋白纯化步骤简便,纯化条件温和,对蛋白也不会产生太大影响。
鸸SDS-PAG E法测定H i s.tag融合蛋白分子量产生偏差的原因唐威华( 中国科学院上海植物生理研究所,上海200032)张景六王宗阳洪孟民摘要:}矗争懈/M .N TA系统是新发展起来的一个亲和纯化重组蛋白的有用工具,现常用于基因编码产物的特性研究中。sDs_PAcE是实验室测定蛋白质分子量通常采用的方法,而许多实验室用此...
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篇名 SDS-PAGE法测定His-tag融合蛋白分子量产生偏差的原因 来源期刊 植物生理学报 学科 关键词 年,卷(期) 2000,(1) 所属期刊栏目 研究方向 页码范围 64-68 页数 5页 分类号 字数 3523字 语种 中文 DOI 10.3321/j.issn:1671-3877.2000.01.012 五维指标 L研究深度权威性读者评价文章热度创新性100050100...
由于引入的His 2tag 分子量小,几乎不影响蛋白原有的功能,而且纯化方便,这一系统现已为许多分子生物学研究者采用。但在实际工作中采用这一系统时也会遇到一些问题,首先遇到的就是融合蛋白分子量的检测问题。目前许多实验室测定蛋白质分子量通常是用十二烷基硫酸钠2聚丙烯酰胺凝胶电泳(S DS 2PAGE )的方法。此方法...
由于引入的His -tag 分子量小,几乎不影响蛋白原有的功能,而且纯化方便,这一系统现已为许多分子生物学研究者采用。但在实际工作中采用这一系统时也会遇到一些问题,首先遇到的就是融合蛋白分子量的检测问题。目前许多实验室测定蛋白质分子量通常是用十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS -PAGE )的方法。此方法主要...
个His2tag融合蛋白P732His时,首先用SDS2PAGE法测 得其分子量确实比理论计算值大,然后对其进行C末 端氨基酸顺序测定、电喷雾质谱分析,结果证实其实际 分子量与理论值一致。酶切去除包括His2tag在内的 部分肽段使SDS2PAGE法测量蛋白分子量的偏差大大 降低,证实His2tag确实是造成偏差的原因之一。推测 ...