HIS-Tag由6-10个组氨酸残基组成,分子量不到0.84KD,通常插入在目的蛋白的C末端或N末端。HIS-Tag是目前原核表达最常用的标签,蛋白纯化完之后可以不需切除此标签,也不会对蛋白产生功能影响。同时,蛋白纯化步骤简便,纯化条件温和,对蛋白也不会产生太大影响。 三,GST-Tag(谷胱甘肽巯基转移酶标签) GST-Tag相对分子质量...
His Tag(组氨酸标签)是蛋白质重组技术中常用的一种标签,由6到10个连续的组氨酸(His)残基组成,其中,最常用的His标签是6xHis标签。该标签的分子量较小,约为0.8 kDa,通常插入在目的蛋白的C末端或N末端。His Tag在蛋白质纯化和检测中起着重要作用,具有以下特点和用途:特点 分子量小:His Tag的分子量小...
原因:主要是因为蛋白和柱子结合能力不足导致的,也可能是目的蛋白无His-tag序列或者结合条件不对导致。 (1)His标签没有充分暴露:在蛋白中加入适量的尿素或盐酸胍等变性剂,若可以挂柱则尝试在变性条件下纯化,如果不能接受蛋白变性纯化,那可以在上游分子水平改变His的长度或位置,让His暴露在蛋白表面。 (2)His标签是否...
中文名称:His-tag 标签多肽,His6 CAS号:64134-30-1 单字母:H2N-HHHHHH-OH 氨基酸个数:6 分子式:C36H44N18O7 平均分子量:840.85 精确分子量:840.36 等电点(PI):7.98 pH=7.0时的净电荷数:1.39 平均亲水性:-0.5 疏水性值:-3.2 储存条件:Powder -80°C 2 years -20°C 1 year In solvent -80°C ...
图1.百奥莱博的BalbZonase超级核酸酶(≥99%,with His-tag)消化质粒DNA的效果图。在50μL反应体系(10mM Tris pH8.0,2mM MgCl2)中,加入5μg质粒DNA,及相应量的本产品或Competitor M,37℃孵育30min,反应完毕后立即置于冰浴,并加入1μL 0.5M EDTA以终止反应。取出10μL反应产物,加入2μL DNA上样缓冲液(...
别名 His Tag;His Synthetic Peptide;His Tag Peptide;Hexa-histidine;Hexa His Tag Peptide 纯化 ~98% by HPLC 分子式 C36H44N18O7 分子量 ~840.85 氨基酸序列 His-His-His-His-His-His 序列简写 HHHHHH 溶剂 TBS:50mM Tris-HCl(pH7.4),150mM NaCl. 组分 200μL 1mL 25mg His标签多肽(5mg/mL) 200...
1*TBS (pH7.4), 0.5%BSA, 25%Glycerol. Preservative: 0.05% Sodium Azide. 避免反复冻融。【有效期】 12 个⽉【纯化⽅式】多肽亲和纯化 * 使⽤前先离⼼,以免造成不必要的损失。图: Western blot 检测结果,抗原为His-Tag 融合蛋⽩,显⽰特异性条带分⼦量为:~60kDa 。
本期小编就来详细讲讲His-tag镍(Ni)柱亲和层析的操作步骤、常见问题及相应的解决方法。试剂准备 1、缓冲液1:0.5M NaH2PO4 19mL,0.5M Na2HPO4 81mL,NaCl 29.3g,加适量水溶解,调pH至7.4,定容到1000mL。2、缓冲液2:0.5M NaH2PO4 19mL,0.5M Na2HPO4 81mL,NaCl 29.3g和咪唑34g,加适量水溶解...
贮存缓冲液配方: 1*TBS (pH7.4), 0.5%BSA, 25%Glycerol. Preservative: 0.05% Sodium Azide. 避免反复冻融。 【有效期】 12 个月 【纯化方式】 多肽亲和纯化 * 使用前先离心,以免造成不必要的损失。 图: Western blot 检测结果,抗原为His-Tag 融合蛋白,显示特异性条带分子量为:~60kDa 。