文献中报道了许多研究来表征 HCP 在纯化步骤中的持久性,并随后改进 HCP 缓解策略。虽然 HCP 酶联免疫吸附分析 (ELISA) 是确定批次放行测试中 HCP 水平的行业标准,但液相色谱-串联质谱 (LC-MS/MS) 的进步和实施,使其能够作为正交表征方法,对过程中间体和原料药...
基于LC-MS/MS技术,采用非标签定量(LFQ)方法,通过DSP对HCP进行表征和定量。 鉴定药品原液和药物制剂中的特定HCP。 基于MS技术,测定ELISA试剂对构象(原生)蛋白表位的覆盖率。 鉴定和填补ELISA试剂的检测空白,通过HCP-GAPex策略实现免疫分析的最大化覆盖。 服务...
初期产品的研究，建议使用nanoLC-MS开展相关研。相对与UHPLC-MS，nanoLC-MS即使使用5 µm粒径的色谱填料，灵敏度也可以高50-200倍，如果使用亚2µm的填料，可以获得更高的灵敏度8。NanoLC-MS的高灵敏可以实现0.1 ppm HCP的检测，这样的灵敏度是常规液相（包括2DLC）无法实现的6。表2 常见的HCP分离方法...
高分辨质谱：Orbitrap Exploris 480鉴定出200+种HCP，覆盖度>95%。案例：某融合蛋白原料药因HCP残留引发免疫原性，恒谱生优化亲和层析步骤后残留量下降90%。提供检测服务 全球合规：报告符合ICH Q6B与FDA指南要求。数据深度：提供HCP分类(酶类、膜蛋白等)与风险评级。宿主蛋白残留3天通关！恒谱生检测中心2D-LC-M...
测定生物制品中残留的宿主细胞蛋白的方法主要包括基于特异性抗体的酶联免疫吸附试验(ELISA)和免疫印迹法,以及以液相色谱-质谱(LC-MS)法为代表的非免疫特异性方。目前,ELISA是目前HCP检测最常用的方法,在2020版《中国药典》通则3412/3413/3414中提到的宿主蛋白残留检测方法均为ELISA法。美国药典USP章节中提到可采用电泳...
在免疫亲和的基础上，也可使用LC-MS/MS进行覆盖率分析，并且可以定量分析HCP。LC-MS/MS方法有几个优点：1可以在产品开发的早期鉴定潜在的高风险HCP（图8）；2可以确定单个HCP的相对水平。但由于最终产品中的单个HCP水平非常低，对此方法的灵敏度提出了非常高的挑战。图 8. 一些潜在的高风险HCP HCP ELISA分析方法...
Waters LC-MS工作流程精簡流暢,能讓分析人員在生物治療藥物開發與生產過程中發現並監測ppm水平的宿主細胞蛋白質(HCP),確定潛在的免疫原性觸發因素、確實保障患者安全,同時也能遵守法遵規定。 概述 HCP是在生物治療藥物生產過程中源自表達系統的內源性製程相關不純物。即便只有微量水平(0.1–10...
ELISA是分析HCP的常用技术，可以在毫克级产品中检测到ppm水平的HCP杂质，但该方法无法提供样品中单个HCP的身份和数量信息。因此需要采用LC-MS/MS进行相互验证，与ELISA技术互为补充。百泰派克生物科技提供生物制药分析服务，其中包括宿主蛋白残留（HCP）分析服务。百泰派克生物科技具有经验丰富的技术人员，可以提供从实验设计...
在免疫亲和的基础上,也可使用LC-MS/MS进行覆盖率分析,并且可以定量分析HCP。LC-MS/MS方法有几个优点: 1. 可以在产品开发的早期鉴定潜在的高风险HCP(图8); 2. 可以确定单个HCP的相对水平。但由于最终产品中的单个HCP水平非常低,对此方法的灵敏度提出了非常高的挑战。
2023年5月,USP1132.1通则:介绍LC-MS技术在rHCP检测中的应用。未来,质谱法在rHCP检测中的应用会越来越完善和成熟。 不同开发阶段对于HCP检测的要求 开发早期阶段,可采用商品化通用试剂盒,但进入三期临床试验阶段,因商品化通用试剂盒的覆盖度不足限制,就需要使用经过验证的,产品特异性的试剂盒。