初期产品的研究，建议使用nanoLC-MS开展相关研。相对与UHPLC-MS，nanoLC-MS即使使用5 µm粒径的色谱填料，灵敏度也可以高50-200倍，如果使用亚2µm的填料，可以获得更高的灵敏度8。NanoLC-MS的高灵敏可以实现0.1 ppm HCP的检测，这样的灵敏度是常规液相（包括2DLC）无法实现的6。表2 常见的HCP分离方法...
文献中报道了许多研究来表征 HCP 在纯化步骤中的持久性,并随后改进 HCP 缓解策略。虽然 HCP 酶联免疫吸附分析 (ELISA) 是确定批次放行测试中 HCP 水平的行业标准,但液相色谱-串联质谱 (LC-MS/MS) 的进步和实施,使其能够作为正交表征方法,对过程中间体和原料药...
测定生物制品中残留的宿主细胞蛋白的方法主要包括基于特异性抗体的酶联免疫吸附试验(ELISA)和免疫印迹法,以及以液相色谱-质谱(LC-MS)法为代表的非免疫特异性方。目前,ELISA是目前HCP检测最常用的方法,在2020版《中国药典》通则3412/3413/3414中提到的宿主蛋白残留检测方法均为ELISA法。美国药典USP章节中提到可采用电泳...
质谱法是鉴定HCP污染物的一个非常强大的工具,而LC-MS/MS可以与质谱法互补,在免疫分析方法的开发过程中,对特定HCP杂质进行鉴定和定量。采用质谱技术对产品和生产样品中的蛋白质进行直接鉴定,再加上基于MS的免疫亲和实验,这两种方法的智能组合能够提供关于下游工艺...
初期产品的研究,建议使用nanoLC-MS开展相关研。相对与UHPLC-MS,nanoLC-MS即使使用5 µm粒径的色谱填料,灵敏度也可以高50-200倍,如果使用亚2µm的填料,可以获得更高的灵敏度8。NanoLC-MS的高灵敏可以实现0.1 ppm HCP的检测,这样的灵敏度是常规液相(包括2DLC)无法实现的6。
ELISA是分析HCP的常用技术，可以在毫克级产品中检测到ppm水平的HCP杂质，但该方法无法提供样品中单个HCP的身份和数量信息。因此需要采用LC-MS/MS进行相互验证，与ELISA技术互为补充。百泰派克生物科技提供生物制药分析服务，其中包括宿主蛋白残留（HCP）分析服务。百泰派克生物科技具有经验丰富的技术人员，可以提供从实验设计...
在免疫亲和的基础上，也可使用LC-MS/MS进行覆盖率分析，并且可以定量分析HCP。LC-MS/MS方法有几个优点：1可以在产品开发的早期鉴定潜在的高风险HCP（图8）；2可以确定单个HCP的相对水平。但由于最终产品中的单个HCP水平非常低，对此方法的灵敏度提出了非常高的挑战。图 8. 一些潜在的高风险HCP HCP ELISA分析方法...
高分辨质谱：Orbitrap Exploris 480鉴定出200+种HCP，覆盖度>95%。案例：某融合蛋白原料药因HCP残留引发免疫原性，恒谱生优化亲和层析步骤后残留量下降90%。提供检测服务 全球合规：报告符合ICH Q6B与FDA指南要求。数据深度：提供HCP分类(酶类、膜蛋白等)与风险评级。宿主蛋白残留3天通关！恒谱生检测中心2D-LC-M...
当前已开发出多种互补的分析用于监测宿主细胞蛋白(HCP),包括1D/2D-PAGE、基于质谱(MS)的分析技术等。如通过二维液质联用(2D-LC-MS)识别潜在的残留HCP,可以开发出基于目标的多反应监测(MRM)-LC-MS的方法来量化原液中的多个HCP。 DDA蛋白质组学:采用数据依赖性采集模式(Data Dependent Acquisition,DDA)进行较高...
宿主细胞蛋白(HCP)是由宿主细胞产生的与工艺相关的杂质,通常在重组生物制药产品中的含量较低。一直以来,在治疗性蛋白药物的生产中通常采用酶联免疫吸附试验(ELISA)监测HCP的总含量。现在,随着技术的不断改进和升级,液相色谱-质谱联用(LC-MS)也越来越...