GST,全称为glutathione-S-transferase,即为谷胱甘肽-S-转移酶蛋白,可以与谷胱甘肽(glutathione,GSH)结合,其与CoIP实验都是验证蛋白互作的有效方法。 1、GST pull-down和与CoIP的区别 GST pull-down一般用于…
GST，全称glutathione-S-transferase，即谷胱甘肽-S-转移酶蛋白，能够和谷胱甘肽（Glutathione，GSH）稳定结合。把GSH与琼脂糖交联形成GSH琼脂糖珠，就能够将带有GST标签的诱饵蛋白固定，当体系中存在与诱饵蛋白有直接相互作用的靶标蛋白时，它就能够与微珠固相复合物结合而被“拉”下来，也叫GST pull-down实验。它的基...
GST,全称为glutathione-S-transferase,即为谷胱甘肽-S-转移酶蛋白,可以与谷胱甘肽(glutathione,GSH)结合,其与CoIP实验都是验证蛋白互作的有效方法。 GST pull-down和与CoIP的区别GST pull-down:原核纯化蛋…
GST pull-down+GST IB组:表示GST pull-down实验后用GST进行免疫印迹。发现三组均有条带,表明GST pull-down实验体系可以正常发挥功能,也表明各组体系中含有GST相关的组分。 Input + YFP IB组:表示不经过GST pull-down实验,直接对实验前各组的混合体系用YFP进行免疫印迹,是阳性对照组表明各组有YFP相关组分。 文献...
GST-pull down 一、实验步骤1. 重组蛋白表达与纯化 1）将将编码蛋白A的GST标签重组质粒转化到BL21或者Rosetta DE3感受态细胞中。2）向高压灭菌的锥形瓶中倒入150 ml LB培养基，按照1:1000加入氨苄青霉素储液（工作浓度为50 μg/ml）。用高压灭菌过的10 μl枪头挑取平板上的单克隆菌落，37℃条件下以200 rpm...
应用GSTPull-Down实验验证NF-κB相互作用多肽 摘要 核因子-κB(NF-κB)是一种普遍存在的转录因子它在免疫应答炎症反应病 毒复制细胞凋亡和增殖等多种细胞活动中起关键的作用研究表明NF-κB可高 效诱导60多种细胞因子粘附分子趋化因子和急性期反应蛋白的基因表达同时 ...
GST-pulldown操作流程 实验目的:体外检测蛋白质与蛋白质之间相互作用。用于验证两个已知蛋白的相互作用,或者筛选与已知蛋白相互作用的未知蛋白。实验原理:利用重组技术将探针蛋白与GST(G 实验目的:体外检测蛋白质与蛋白质之间相互作用。用于验证两个已知蛋白的相互作用,或者筛选与已知蛋白相互作用的未知蛋白。
GST pull-down实验原理 GST,全称glutathione-S-transferase,即谷胱甘肽-S-转移酶蛋白,能够和谷胱甘肽(Glutathione,GSH)稳定结合。我们把GSH与琼脂糖交联形成GSH琼脂糖珠,就能够将带有GST标签的诱饵蛋白固定,当体系中存在与诱饵蛋白有直接相互作用的靶标蛋白时,它就能够与微珠固相复合物结合而被“拉”下来。
GST,全称为glutathione-S-transferase,即为谷胱甘肽-S-转移酶蛋白,可以与谷胱甘肽(glutathione,GSH)结合,其与CoIP实验都是验证蛋白互作的有效方法。 GST pull-down和与CoIP的区别 GST pull-down一般用于体外实验,因为诱饵蛋白是需要加上GST标签的重组蛋白,所以是非生理状态下的验证,蛋白质的结构和形式可能与天然状态下存...