GST pull down+GST IB组:表示GST pull down实验后用GST进行免疫印迹。发现三组均有条带,表明GST pull down实验体系可以正常发挥功能,也表明各组体系中含有GST相关的组分。 Input + YFP IB组:表示不经过GST pull down实验,直接对实验前各组的混合体系用YFP进行免疫印迹,是阳性对照组表明各组有YFP相关组分。 6、...
GST pull-down实验，也称GST融合蛋白沉降技术，是利用谷胱甘肽S-转移酶（GST）标记诱饵蛋白进行的Pull down实验。GST pull-down可用于证实已知的蛋白或肽的相互作用，也可以用来挖掘未知的蛋白或肽的相互作用。百泰派克生物科技提供高效快速的GST pull-down 蛋白互作分析服务，可用于鉴定两种已知的兴趣蛋白质可能存在的...
GST,全称为glutathione-S-transferase,即为谷胱甘肽-S-转移酶蛋白,可以与谷胱甘肽(glutathione,GSH)结合,其与CoIP实验都是验证蛋白互作的有效方法。今天就简单介绍下GST pull-down实验,希望能让做相关实验的小伙伴对此有更深入的理解。 一、实验原理 利用重组技术将诱饵蛋白A与GST进行融合,然后将GSH固定于琼脂糖珠,形成...
GST融合蛋白Pull-down技术也称GST pull-down或GST pull-down融合蛋白沉降技术,是在GST融合蛋白以及Pull Down技术的基础上发展起来的研究体外蛋白质与蛋白质相互作用的技术,实质上是一种利用谷胱甘肽S-转移酶(GST)作为亲和标签进行的Pull-down实验。 该技术利用基因重组技术得到GST标记的融合蛋白,再利用GST对谷胱甘肽(GSH...
0 1 gst pull-down实验原理 gst ,全称glutathione-s-transferase,即谷胱甘肽-s-转移酶蛋白,能够和谷胱甘肽(glutathione,gsh)稳定结合。我们把gsh与琼脂糖交联形成gsh琼脂糖珠,就能够将带有gst标签的诱饵蛋白固定,当体系中存在与诱饵蛋白有直接相互作用的...
一、GST pull down实验原理 GST pull down的主要原理是利用DNA重组技术将已知蛋白与GST融合，而融合蛋白通过GST与固化在载体上的GTH（谷胱甘肽）亲和结合。简单来说，我们假定a蛋白和b蛋白可能存在互作，将纯化的融合GST的a蛋白和纯化的b蛋白以及能特异性结合GST的Sephrose 4B beads混合在一起孵育一定时间，然后洗去未...
GST pull-down实验原理 GST,全称glutathione-S-transferase,即谷胱甘肽-S-转移酶蛋白,能够和谷胱甘肽(Glutathione,GSH)稳定结合。我们把GSH与琼脂糖交联形成GSH琼脂糖珠,就能够将带有GST标签的诱饵蛋白固定,当体系中存在与诱饵蛋白有直接相互作用的靶标蛋白时,它就能够与微珠固相复合物结合而被“拉”下来。
GST Pull-down实验用于研究蛋白之间的直接或间接相互作用，此外还可以结合色谱串联质谱（LC-MS/MS）筛选已知蛋白的未知互作蛋白。由于实验时需要将蛋白在体外纯化出来，因此这种方法属于体外研究蛋白互作的方法。实验原理 GST Pull-down实验的基本原理是将靶蛋白-GST融合蛋白亲和固化在谷胱甘肽亲和树脂上，作为与目的蛋白...
GST-诱饵蛋白原核表达载体构建/His-猎物蛋白原核表达载体构建—原核表达—蛋白纯化—Pull-down捕获猎物蛋白—SDS-PAGE电泳—Western blot或LC-MS/MS 服务内容及说明 适用场景 1、用于验证两个已知蛋白的相互作用；2、筛选与已知蛋白相互作用的未知蛋白。实验周期 拉下实验（Pull-down）的优点 1、鉴定的蛋白是直接作用...