(2)用Ni-IDA Binding-Buffer冲洗层析柱,至流出液OD280值到达基线; (3)用Ni-IDA Washing-Buffer冲洗层析柱,至流出液OD280值到达基线; (4)用Ni-IDA ELution-Buffer洗脱目的蛋白,收集流出液; (5)收集的蛋白溶液加入透析袋中,使用Tris-HCl进行透析过夜; (6) 进行SDS-PAGE分析和WB分析。 3.GST-Pull Down实验 ...
(2)用Ni-IDA Binding-Buffer冲洗层析柱,至流出液OD280值到达基线; (3)用Ni-IDA Washing-Buffer冲洗层析柱,至流出液OD280值到达基线; (4)用Ni-IDA ELution-Buffer洗脱目的蛋白,收集流出液; (5)收集的蛋白溶液加入透析袋中,使用Tris-HCl进行透析过夜; (6)进行SDS-PAGE分析和WB分析。 3.GST-Pull Down实验 ...
GST pull-down 千呼万唤始出来,终于要见证两个蛋白的相爱了,好激动! 1.纯化好的 GAT-A beads 在使用前用冰 PBS 洗 3 遍,每遍 500 g/min,4 ℃ 离心 5 min。 2.加入适量的 His-B 纯化蛋白(作者君认为 10ug 的量做 pull-down 已经足够了),binding buffer 是 PBS。
首先简要介绍一下 GST pull-down 技术,高大上的说法是通过已经标记的 GST标签蛋白,从细胞裂解液中钓出与之相互作用的蛋白,用以确定已知蛋白与钓出蛋白或已纯化的相关蛋白间的相互作用关系。 通俗地讲就是 GST 标签的 A 蛋白(GST-A)与另一标签的 B 蛋白(作者君用的是 His 标签纯化的体外蛋白 His-B)是否相...
（4）用Ni-IDA ELution-Buffer洗脱目的蛋白，收集流出液;（5）收集的蛋白溶液加入透析袋中，使用Tris-HCl进行透析过夜;（6）进行SDS-PAGE分析和WB分析。3.GST-Pull Down实验 使用GST Protein Interaction Pull-Down Kit (购自Thermo公司)3.1平衡树脂（GST）(1)混匀Immobilized Glutathione，彻底重悬树脂...
上海复名医疗科技有限公司生产的蛋白互作GST Pull-Down试剂盒,品名:Smart-GST™GSTPull-DownKit,货号:IF9604,品牌:Engibody订购及技术咨询:朱小鸥,13817407320(微信同号)N
3.GST-Pull Down实验 使用GST Protein Interaction Pull-Down Kit (购自Thermo公司)3.1平衡树脂（GST...
蛋白互作GST Pull-Down试剂盒 英文名称: GST Pull-Down Kit 总访问: 268 国产/进口: 进口 半年访问: 176 产地/品牌: Engibody美国 产品类别: 细胞生物学试剂 规格: 24个反应 最后更新: 2024-9-26 货号: IF9604 CAS 号: 参考报价: 2500 立即询价 电话咨询 ...
Pull-down是一种小规模亲和纯化技术,与免疫沉淀反应类似,但其抗体功能被某些其他亲和系统代替。在这种情况下,亲和系统是一种可被谷胱甘肽琼脂糖微珠捕获的 GST 标签蛋白。融合标记蛋白质作为捕获推定连结配偶体(即猎物)的诱饵。在典型的pull-down 试验中,固定的诱饵蛋白质与细胞裂解液一起孵育。在规定的洗涤步骤后,...
GST pull down 实验细节问题求教网友 1 最佳答案 回答者:网友 GST pull-down实验是一个行之有效的验证酵母双杂交系统的体外试验技术,近年来越来越受到广大学者的青睐。其基本原理是将靶蛋白-GST融合蛋白亲和固化在谷胱甘肽亲和树脂上,作为与目的蛋白亲和的支撑物,充当一种“诱饵蛋白”,目的蛋白溶液过柱,可从中捕获...