GST标签蛋白亲和纯化,其配基通常是GST的底物谷胱甘肽(GSH),通过酶与底物的特异性结合来实现GST蛋白的分离纯化。其原理是:在固相基质上通过巯基结合一个谷胱甘肽,然后利用谷胱甘肽与谷胱甘肽巯基转移酶之间的特异性作用力,使得带GST标签的融合蛋白与基质上的谷胱甘肽结合,达到分离纯化的目的。 图2 固相基质与配基GSH偶联实现...
在设计时,用于GST标签蛋白纯化的亲和填料利用了谷胱甘肽的结构和GST(谷胱甘肽S-转移酶)的结合位点互补的特点,通过将谷胱甘肽SH基团与琼脂糖介质上的预活化基团偶联,形成特异性的亲和填料。 在纯化过程中,带有GST标签的目标蛋白与琼脂糖介质上交联的谷胱甘肽配体发生互补性结合。这种结合具有可逆性,可以在温和、非变性的条...
GST融合蛋白纯化磁珠(Magarose-GSH)具有高效、快速、方便等特点,是公司针对纯化 GST 标签融合蛋白而研制的一种新型纯化介质,可通过磁性分离方式直接从生物样品中一步获得高纯度的目标蛋白,极大地简化纯化工艺和提高纯化效率,适合科研和工业领域便捷地进行 GST 融合蛋白的纯化。使用Magarose-GSH磁珠进行 GST Pull-down ...
如果GST标签需要切除,包含 PreScission™ 蛋白酶识别位点、Thrombin识别位点或Factor Xa识别位点的标签蛋白可以在与GSTrap预装柱结合时或在洗脱后进行标签去除。 一般来说,柱上酶切是推荐的方法,因为许多潜在的杂质都能被洗掉,目的蛋白洗脱时具有更高的纯度。如果切割条件需要优化,建议在洗脱后进行标签去除。 以下GST标...
目前有多种用于蛋白纯化的亲和标签,而GST标签就是其中之一。GST是谷胱甘肽巯基转移酶的简称,指的是整个蛋白质,而不是像Rho1D4标签仅指几个氨基酸。自20世纪80年代末GST标签就开始用于蛋白质纯化(Smith & Johnson 1988),并被确立为需要极高纯度的蛋白质纯化试验的可靠方法(Harper & Speicher 2013)。GST标签的大小...
首先,GST标签被广泛应用于蛋白质的纯化中。当与带谷胱甘肽配基的亲和介质特异性结合时,GST标签可以纯化出目标蛋白。这是因为GST通过催化还原型谷胱甘肽(GSH)与有毒化合物的偶联反应,增加了目标蛋白的水溶性,使其更容易从细胞中释放并被纯化。纯化后的蛋白可以用特异性的酶将GST标签切除,从而得到天然蛋白。 其次,GST标...
谷胱甘肽琼脂糖凝胶提供了一步纯化方法,并允许对含有谷胱甘肽结合序列的蛋白质进行快速、温和以及高特异性的纯化。通过使用含有还原型谷胱甘肽的缓冲液洗脱,已结合的 GST融合蛋白容易从填料中被取代。 该填料用于纯化谷胱甘肽 -S- 转移酶(GST) 以及带有 GST 标签的融合蛋白。
GST标签是一种融合标签,通常位于蛋白质的N端或C端。GST标签是由谷氨酰转移酶(Glutathione S-transferase)的氨基酸序列衍生而来,该酶在细胞内具有高度保守性,因此GST标签在不同物种中都有很好的应用效果。 GST标签的氨基酸序列通常包括三个部分:N端部分、核心部分和C端部分。N端部分通常是GST标签的前10-20个氨基酸,...
GST Tag 抗体是一种广泛应用于生物学研究和蛋白质工程领域的工具,主要用于检测和纯化携带GST(谷胱甘肽-S-转移酶)标签的蛋白质。本文将介绍GST Tag 抗体的制备方法以及其在蛋白质表达、纯化和相互作用研究中的重要应用。 引言: GST Tag,又称GST融合标签,是一种用于蛋白质工程和分子生物学研究的常见标签。它通常与目...
上海雅吉生物的GST标签蛋白纯化试剂盒(GST-tag Protein Purification Kit),俗称GST柱试剂盒,是一种采用了新型的BeyoGold™ GST-tag Purification Resin,并能简单、快速、高效并且高特异性地纯化GST标签蛋白的试剂盒。 试剂盒提供了GST标签蛋白纯化所需的相关试剂和亲和层析柱空柱管,为GST标签蛋白的纯化带来了极大的...