WB心得细胞焦亡相关实验中,跑GSDMD-n的一点心得体会,就是提完蛋白放四度不要冻起来直接跑,趋势就是对的。敷二抗液体可以多一点。细胞上清蛋白可以用甲醇氯仿法,屡试不爽,就是在干燥的时候不要高温,有条件可以试一下真空离心干燥,另外上清蛋 - 嘉嘉搞科研于20240729
Gasdermins（GSDM）是一种由细胞质感知侵袭性感染和危险信号而引发的炎症性细胞死亡的介质。一旦被激活，GSDM形成细胞膜孔，释放促炎细胞因子和警报，破坏细胞膜的完整性，引发炎症细胞死亡。焦亡在体内是一个极其复杂的过程，有许多调节机制控制着必需成分，本期将主要介绍GSDM在细胞焦亡中的作用。人类一共有6个GSD...
然后由促炎性Caspases通过经典和非经典炎性体信号通路裂解的GSDMD蛋白生成GSDMD-N末端结构域(GSDMD-N),再由GSDMD-N迅速插入质膜形成活性孔[5,6]。因此,GSDMD-N 充当了细胞焦亡的最终执行者。 Fig.2 GSDMD在焦亡中的作用方式 实验细节 由于GSDMD在细胞焦亡和自身免疫性疾病的炎症中有可能存在作为驱动因素的潜力,是...
线粒体 ROS 会增加心磷脂 OMM 暴露,从而增强焦亡,但不可能是唯一的重要因素,因为与基因消减 Crls1 或 Plscr3 相比,使用线粒体 ROS 清除剂 MitoTEMPO 减少线粒体 ROS 或通过向表达酵母 D-氨基氧化酶的细胞提供 D-Ala 诱导细胞质 ROS 对焦亡的影响较小、 线粒体毒素诱导 ROS 并不能使 Plscr3 或 Crls1 ...
其主要的功能是:当细胞受到病原相关分子模式(PAMPs)和损伤相关分子模式(DAMPs)的刺激时,细胞内的信号感受器(NLR家族,AIM2蛋白以及CARD8,PYRIN等)会诱导形成炎症小体(inflammasome)并激活下游caspase-1/4/5/8/11对GSDMD的N端切割产生p30片段进而上细胞膜成孔引发细胞焦亡和炎性因子释放。
但不会出现焦亡 GSDMD孔通过介导Ca2+内流促进黏蛋白颗粒分泌 最后,作者讨论了GSDMD在黏蛋白颗粒胞吐过程中驱动F-肌动蛋白分解的机制。出乎意料的是,作者发现黏蛋白分泌过程中PI摄取迅速但适度增加,而用GSDMD-N寡聚抑制剂NSA预处理或GSDMD...
巨噬细胞在受到病原相关分子模式(PAMPs)和损伤相关分子模式(DAMPs)的刺激下,通过GSDMD的N端切割产生p30片段进而引发细胞焦亡和炎症,以邵峰院士为首的中国学者在该领域做出了一系列重要的开创性工作。值得注意的是,生理状态下GSDMD在多种组...
该研究表明双硫仑可阻断细胞的焦亡和细胞因子的释放,并可阻断脂多糖诱导的小鼠的败血性死亡。双硫仑抑制GSDMD的作用为该药物安全用于对抗炎症提供了新的治疗指征。 主要结果: 高通量筛选发现双硫仑是GSDMD诱导的脂质体渗漏的有效抑制剂。 研究人员通过荧光脂质体渗漏试验进行了高通量筛选以发现GSDMD的抑制剂,该试验...
caspase-1将GSDMD切割形成两个片段，N端片段聚合并插入质膜，形成内径10-20nm的孔隙【4】。第二种诱导焦亡的方法是通过小鼠caspase-11或人类caspase-4和caspase-5的作用。这些caspases的催化活性不是通过招募到炎性小体进行激活的，而是通过与细胞脂多糖（Lipopolysaccharides，LPS）相结合而激发的。与LPS结合后，活化后...
另外,已知GSDMD蛋白通过其N端片段寡聚化形成的孔隙促进各种促炎介质的分泌,从而执行细胞焦亡。实验证实了Gsdmdf/f小鼠中N端片段寡聚现象显著,但并不影响质膜破裂事件。对肌内分泌物进行了多个OLINK panel检测,覆盖了参与炎症、再生和应激反应等的促炎介质,观察到GSDMD缺乏对整体间质液组成的影响很小,即再生早期Gsdmd...