Learn the principles of Golden Gate cloning and how to simulate standard or batch Golden Gate cloning.
分子克隆之Golden Gate cloningmp.weixin.qq.com/s/cNZ0piWpVsiy8roeJiFnlw
参考文献：Engler, Carola et al. “A one pot, one step, precision cloning method with high throughput capability.” PloS one vol. 3,11 (2008): e3647. doi:10.1371/journal.pone.0003647 Engler, Carola et al. “Golden gate shuffling: a one-pot DNA shuffling method based on type IIs rest...
可以特异性识别双链DNA位点(图1）并进行酶切，适用于质粒DNA、PCR 产物或基因组 DNA 等的限制性酶切。结合连接试剂在配套的Buffer中具有100%活性，支持一管化反应，提升“酶切-修饰-连接”的体验。其识别序列和切割位点如下图：应用场景 1.分子克隆（Golden gate cloning）；2.基因编辑; 3.合成生物学;产品特点...
【2.2】金门克隆 Golden Gate Cloning Addgene 的质粒可用于多种基于限制酶的克隆方法。每种方法都有其优缺点,但金门克隆在合成生物学和基因组工程领域都特别有用。我们将向您介绍如何将这个精确且易于使用的系统应用于您的克隆工作。 Golden Gate 克隆技术依赖于 1996 年首次发现的 IIS 型限制性内切酶。 IIS 型...
of custom TALE-type DNA binding domains by modular cloning和Efficient design and assembly of custom TALEN and other TAL effector-based constructs for DNA targeting 里面有详细的介绍，大体的介绍就是一种最新发现的dna片段组装的技术，能高效的组装dna片段在一个单一的反应。
在本研究中,我们开发了一个Golden Gate cloning系统,该系统由16个表达质粒构成(8个将产生的蛋白传递到线粒体,其他8个传递到叶绿体)和424个转录催化效应器阵列质粒组成,用来组装DddA衍生的胞嘧啶碱基编辑器(DdCBE)并用所得到的DdCBEs有效地促进线粒体和叶绿体点突变。DdCBEs诱导莴苣或油菜愈伤组织碱基编辑频率高达25...
Golden Gate cloning allows the assembly of multiple fragments in a single reaction, making the process efficient and seamless. Although Golden Gate strategies have already been employed for different organisms, it is still not well-established for Actinobacteria. Here, we describe methods for Golden ...
具体的方法可参考2020年新发表的文章:Synthetic DNA Assembly Using Golden Gate Cloning and the Hierarchical Modular Cloning Pipeline,具体信息在文末给出。该文描述了5种basic protocol,并给出了案例分析以及实验条件,由于本文篇幅有限,则不再展开该文,但非常值得一读。
克隆是英文“clone”或“cloning”的音译,而英文“clone”则起源于希腊文“Klone”,原意是指以幼苗或嫩枝插条。1963年J.B.S.Haldane在题为“人类种族在未来二万年的生物可能性”的演讲上采用“克隆(Clone)”的术语,把“克隆技术”带到了人们的视野中。