总之,Golden Gate克隆法是一种强大的DNA重组工具,特别适用于多片段组装的DNA分子,但在使用之前需要考虑其特定的优势和劣势,并根据研究需求做出选择。参考文献:Engler, Carola et al. “A one pot, one step, precision cloning method with high throughput capability.” PloS one vol. 3,11 (2008): e364...
另外,为了帮助大家更好的理解Golden Gate克隆技术的原理,小远专门翻译了一条视频帮助大家理解,大家一定要点击文末彩蛋观看视频哦~ References: Engler C, Kandzia R, Marillonnet S. A one pot, one step, precision cloning method with high throughput capability. PLoS One. 2008, 3(11): e3647. Engler...
使用Gateway 克隆系统会产生含有一个编码8个氨基酸的attB重组痕迹的结构,但是Golden Gate连接能设计成无痕的,并且比许多商业化的克隆方法都要便宜。 02Golden Gate和合成生物学 合成生物学已经将Golden Gate克隆方法用在了分子克隆策略中,有时称其为MoClo,这个策略利用了IIS型限制酶BsaI和BpiI/BbsI可一次性有效组装多达...
Learn the principles of Golden Gate cloning and how to simulate standard or batch Golden Gate cloning.
1、时间短:Golden Gate克隆就实验时间而言是最简单的克隆方法,因为酶切和连接在一个30min的反应中即可完成。 2、效率高:destination载体和entry载体被添加在一个含有IIS型限制酶和连接酶的管中,虽然原始的destination载体和插入片段还可以自连接,但是由于仍含有IIS型限制酶识别位点,所以还会被酶切;而成功的连接产物不...
1.分子克隆(Golden gate cloning);2.基因编辑; 3.合成生物学;产品特点 01 酶切效果 媲美进口品牌N* 02 高性能 搭配高浓度T4 连接酶,适用于SgDNA,单片段及多片段连接,且连接效率与竞品相当 03 个性化定制 支持高浓度和低浓度及定制浓度,满足客户多种需求 产品数据展示 1、酶活鉴定 以1μg质粒为模板,...
【2.2】金门克隆 Golden Gate Cloning Addgene 的质粒可用于多种基于限制酶的克隆方法。每种方法都有其优缺点,但金门克隆在合成生物学和基因组工程领域都特别有用。我们将向您介绍如何将这个精确且易于使用的系统应用于您的克隆工作。 Golden Gate 克隆技术依赖于 1996 年首次发现的 IIS 型限制性内切酶。 IIS 型...
1.分子克隆(Golden gate cloning); 2.基因编辑; 3.合成生物学; 媲美进口品牌N* 搭配高浓度T4 连接酶,适用于SgDNA,单片段及多片段连接,且连接效率与竞品相当 支持高浓度和低浓度及定制浓度,满足客户多种需求 1、酶活鉴定 以1μg质粒为模板,20ul反应体系,投入10U Eco31I,37℃ 反应1h,80℃ 失活20min;活力...
在本研究中,我们开发了一个Golden Gate cloning系统,该系统由16个表达质粒构成(8个将产生的蛋白传递到线粒体,其他8个传递到叶绿体)和424个转录催化效应器阵列质粒组成,用来组装DddA衍生的胞嘧啶碱基编辑器 (DdCBE)并用所得到的DdCBEs有效地促进线粒体和叶绿体点突变。DdCBEs诱导莴苣或油菜愈伤组织碱基编辑频率高达...
推荐你几篇文献:都是做这个方向的Assembly of designer TAL effectors by Golden Gate cloning和Efficient design and assembly of custom TALEN and other TAL effector-based constructs for DNA targeting还有Generation of families of construct variants using golden gate shuffling和 A one pot, one ...