mrfp-gfp-lc3 是一种用于检测自噬过程的荧光报告系统,由 mRFP-GFP 融合蛋白和 LC3 蛋白组成。mRFP-GFP 融合蛋白能够反映自噬泡的融合过程,LC3 蛋白则可以作为自噬体的标志物。mrfp-gfp-lc3 自噬评判标准是基于这一荧光报告系统,通过对细胞内 mRFP 和 GFP 信号的动态变化以及 LC3 puncta 的形成来评估自噬的活性和...
分析GFP-Lc3和GFP-Gabarap转基因 斑马鱼胚胎中的自噬活动 摘要: 自噬可介导大量胞内组分在溶酶体中的降解。在动物胚胎发育过程 中,卵黄蛋白的迅速降解和受精卵蛋白的合成导致胞内各结构的成型和细胞的分 化。斑马鱼是一种用来研究自噬的很独特的系统——部分是因为相对于其它生 物,斑马鱼的胚胎发育迅速。斑马鱼在技术...
MRFp-GFP-LC3是一种融合蛋白,将MRFp和GFP与LC3融合在一起,可以通过观察细胞内自噬囊泡膜上的MRFp-GFP-LC3信号来定量细胞的自噬活性。 评判标准: 1.自噬囊泡膜的形成:正常情况下,细胞内的MRFp-GFP-LC3表达时呈现为一个均匀分布的绿色荧光信号。当自噬过程发生时,MRFp-GFP-LC3会在囊泡膜上形成点状或环状的荧光...
单荧光质粒系统检测 利用LC3在自噬形成过程中发生聚集的现象开发出了GFP-LC3指示技术: 无自噬时,GFP-LC3融合蛋白弥散在胞浆中; 自噬形成时,GFP-LC3融合蛋白转位至自噬体膜,在荧光显微镜下形成多个明亮的绿色荧光斑点,一个斑点相当于一个自噬体,可以通过计数来评价自噬活性的高低。 Ref: Autophagic flux disruption co...
mRFP-GFP-LC3腺病毒,mRFP用于标记与追踪LC3,GFP的减弱可指示 溶酶体与自噬小体的融合形成自噬溶酶体,即由于GFP荧光蛋白对酸 性敏感,当自噬体与溶酶体融合后GFP荧光发生淬灭,此时只能检测 到红色荧光。这种串联的荧光蛋白表达载体系统直观清晰的指示了细
servicehanbionetwwwhanbionet自噬双标腺病毒mrfpgfplc3使用指南mrfpgfplc3串联荧光蛋白腺病毒中表达的gfp和mrfp用于标记及追踪lc3gfp的减弱可指示溶酶体与自噬小体的融合形成自噬溶酶体由gfp荧光蛋白对酸性敏感当自噬体与溶酶体融合后gfp荧光发生淬灭此时只能检测到红色荧光原理如下图所统计方法我们在显微镜成像后红绿荧光...
自噬形成时，胞浆型LC3（即LC3-I）会酶解掉一小段多肽，转变为（自噬体）膜型（即LC3-II），因此可利用WB检测LC3-II/I比值的变化以评估自噬的强弱。此外自噬衔接物如sequestosome 1（SQSTM1，也称为p62）也可用于检测自噬，p62蛋白水平的多少与自噬强弱有着反比例关系。2.3荧光蛋白标记检测 2.3.1 GFP-LC3 ...
研究结果表明TRPC1可促进lps触发的细胞内Ca2+释放，介导小穴蛋白-1减少，进而激活calpain调节心肌凋亡和自噬，从而导致ETM诱导的小鼠心功能障碍。图5 小鼠心脏在攻毒前4周转染AAV9-mRFP-GFP-LC3荧光图像 至此，本期内容就结束了，主要介绍了自噬的概念，研究思路和工具并分享了两个关于大自噬的研究案例，大家是否对...
可以通过RFP-GFP-LC3双标腺病毒检测。GFP在酸性环境中降解，红绿荧光merge后通过merge后出现的黄色斑点即只是自噬体.红色的斑点指示自噬溶酶体。如吞噬体和溶酶体能正常融合，那么红色荧光多于黄色荧光，如自噬下游阻滞，吞噬体和溶酶体不能正常融合，则主要为黄色荧光。
自噬病毒工具，便于直接感染目的细胞后直观地观察细胞自噬的整体水平。自噬单荧光标记慢病毒 吉满自主研发出单荧光(绿光或红光)标记的自噬指示产品，当细胞内没有自噬发生时，荧光-LC3融合蛋白会均匀地分散在细胞质中，一旦细胞发生自噬活动，荧光-LC3融合蛋白就会聚集并转位到自噬体膜，此时在荧光显微镜下可清晰地观察到...