Gal4-UAS原理是一种用于研究基因表达的方法,主要应用于果蝇(Drosophila melanogaster)模型生物中。Gal4是来自酵母菌GAL10基因的转录因子,能够特异性结合到其识别序列UAS(Upstream Activating Sequence),进而调控靶基因的转录。 Gal4-UAS系统包括两个关键组成部分:Gal4转录因子和UAS响应元件。Gal4转录因子经过基因工程的手...
GAL4：酵母转录因子基因，受特定启动子控制。UAS：被GAL4激活的外源插入基因序列，用于实现基因表达。工作原理：GAL4蛋白在特定启动子的控制下，被合成并转运至细胞核内。GAL4蛋白识别并结合到UAS序列上，从而激活包含UAS的外源基因的表达。调控机制：可以通过选择不同的启动子来控制GAL4的表达，进而控制外...
GAL4/UAS是从酵母菌中发现的DNA序列,GAL4蛋白是一个转录激活因子,可以特异性识别并结合DNA分子上的UAS序列,激活该序列下游的基因转录。研究人员将GAL4基因和上游连接 UAS序列的待测基因(基因N)分别转入果蝇细胞中,通过控制基因N的表达来研究基因N功能。研究过程如图所示。步骤1:获得纯合GAL4品系果蝇步骤2:获得纯合...
例如,编码Gal4的基因被整合到果蝇翅膀中表达的基因的基因组位置。Wing-enh驱动UAS转基因在发育中的翅膀中表达。在这个例子中,UAS转基因编码了NotchDN(突变),当它在翅膀中表达时会导致缺口翅膀表型。这个1993年的研究彻底改变了我们对果蝇进行遗传学研究的方式,他们的论文也成为果蝇领域被引用次数最多的论文。 驱动基...
GAL4是一种特异性激活UAS的转录激活因子，是我们做酵母双杂常用的核心AD和BD的来源，BD就是和UAS的DNA...
图3 酵母双杂实验原理(Brückner et al., 2009)。(A)感兴趣的蛋白质X,被融合到DNA结合域(DBD),该结构被称为诱饵。潜在的相互作用蛋白Y被融合到激活域(AD)上,该结构被称为猎物。(B)诱饵,即DBD-X融合蛋白,结合启动子的上游激活子序列(UAS)。诱饵与猎物(即AD-Y融合蛋白)的相互作用,招募AD,从而重建一个功...
🔍 DNA结合域(DNA-BD)位于GAL4的N端,负责识别并绑定到GAL4效应基因上游的激活序列(UAS)。这个区域就像是GAL4的“眼睛”,能够精准找到它要结合的位置。🚀 而转录激活域(AD)则位于C端,它通过与其他转录机构成分相互作用,启动UAS下游基因的转录。这个区域就像是GAL4的“大脑”,负责指挥整个转录过程。
Gal4/UAS是存在于酵母中的基因表达调控系统,Gal4基因表达的Gal4蛋白能够与特定的DNA序列UAS结合,并驱动UAS下游基因的表达。科研人员通过基因工程技术将一个Gal4基因插入到雄果蝇的一条3号染色体上,得到转基因雄果蝇甲。将另-UAS-绿色荧光蛋白基因(简称UAS-GFP基因)随机插入到雌果蝇的某条染色体上,得到转基因雌果...
GAL4蛋白可以识别在GALlO,GALl等五个基因的上游部分都有称为UAS 12 ● ■ ■ ● (Ups仃e锄ActivationSequence)位点,并且GAL4蛋白通过特异的结合UAS位点 来调节这五个基因的表达。UAS有些类似于高等生物的增强子序列,每一个UAS 含有数目不同的结合单元,每个结合单元为17个碱基,顺序为 ...