答:①凯氏定氮法 原理:样品与浓硫酸共热,含氮有机物即分解产生氮(消化),氮又与硫酸作用,变成硫酸氢。经强碱碱化使之分解放出氢气,借蒸汽将氨蒸至酸液中,根据此酸液被中和的程度可计算得样品的氮含量,再乘以6.25,即得样品中蛋白质含量,以甘氨酸为例,反应式为: NH2CH2COOH + 3H2SO4——2CO2+3SO2+4H2...
Folin-酚试剂法(Lowry法)测定蛋白质含量 一、实验原理 蛋白质含有两个以上的肽键(—CO—NH),因此有双缩脲反应,在碱性溶液中,能与CU2+形成络合物。Folin-酚试剂反应是在双缩脲反应的基础上,引进Folin试剂(磷钼酸-钨酸试剂),蛋白质-铜络合物能还原磷钼酸-磷钨酸试剂,生成蓝色物质。在一定条件下,蓝色强度与蛋白...
Lowry 法的显色原理是根据双缩脲反应,蛋白质中的肽键在碱性条件下与Cu2+反应,生成紫红色Cu+复合物。Folin-酚试剂在Cu+的催化下,磷钼酸磷钨酸盐被蛋白质中的芳香族氨基酸残基还原,产生深蓝色的钼蓝和钨蓝混合物,其最大吸收峰在745~750nm处。在一定的浓度范围内,所形成蓝色的深浅与蛋白质含量之间有线性关系,...
一、原理本法是双缩脲反应的发展,它结合了双缩脲法中铜盐反应和Folin试剂反应的特点。试剂甲相当于双缩脲试剂,可与蛋白质中的肽键起显色反应;试剂乙在碱性条件下极不稳定,易被酚类化合物还原而呈蓝色反应。所以,此法是通过肽链或极性侧链的铜络合物较慢反应及芳香族氨基酸的残基,酪氨酸、色氨酸的迅速反应,把磷...
掌握Lowry法测定蛋白质浓度的原理。 [原理] 蛋白质在碱性溶液中其肽键与Cu2+螯合,形成蛋白质一铜复合物,此复合物使酚试剂的磷钼酸还原,产生蓝色化合物,在一定条件下,利用蓝色深浅与蛋白质浓度的线性关系作标准曲线并测定样品中蛋白质的浓度。 [操作] 取试管7支、编号、按下表操作: 立即混匀,在20℃～25℃水浴...
Folin-酚试剂（Folin-phenolreagent）的显色原理主要是：试剂中的磷钼酸-磷钨酸混合物被蛋白质还原，形成多种还原型的混合酸，并且有特殊的蓝色。包括两步反应。㈠试剂甲使蛋白质发生烯醇化反应，在碱性条件下，形成蛋白质-铜络合物，从而使电子转移到混合酸中，大大地增强了酚试剂对蛋白质的敏感性。㈡...
Folin-酚试剂法(Lowry 法)测定蛋白质浓度 [目的] 掌握 Lowry 法测定蛋白质浓度的原理。 [原理] 蛋白质在碱性溶液中其肽键与 Cu2+螯合 形成蛋白质一铜复合物 此复合物使酚试剂的磷钼酸还原 产生蓝色化合物 在一定条件下 利用蓝色深浅与蛋白质浓度的线性关系作标准曲线并测定样品中蛋白质的浓度。 [操作] 取...
A为吸光度(光密度、消光度)，K为常数(消光系数)。4 分光光度法（specrophotometry）的应用A标=KC标L，A测=KC测L C测 A测A标 C标 5 一、实验目的 1.掌握Folin-酚法测定蛋白质含量的原理及操作步骤。2.掌握分光光度计的操作。6 临床意义 1.血清总蛋白增高 血液浓缩：腹泻合成增加：多发性骨髓瘤 ...
1FolinFolin--LowryLowry1.掌握Folin-酚法测定蛋白质含量的原理及操作。2.掌握标准曲线的制作方法。蛋白质(肽键)碱性铜试剂铜-蛋白质络合物(双缩脲反应)试剂甲-CO-NH-紫红色铜-蛋白质络合物(酪氨酸,色氨酸)磷钼酸-磷钨酸磷钼蓝+磷钨蓝试剂乙深蓝色(Folin试剂)31.样品的稀释:准确取血清0.1ml,置于50ml容量瓶...