Folin—酚试剂法最早由Lowry确定了蛋白质浓度测定的基本步骤。以后在生物化学领域得到广泛的应用。这种蛋白质测定法是最灵敏的方法之一。过去此法是应用最广泛的一种方法,由于其试剂乙的配制较为困难(现在已可以订购),近年来逐渐被考马斯亮兰法所取代。原理 此法的显色原理与双缩脲法是相同的,只是加入了第二...
Folin-酚试剂法测定蛋白质含量 一、 实验目的 1, 掌握 Folin-酚试剂法测定蛋白质含量的原理及其具体实验操作技术; 2, 掌握制作标准曲线的要领; 3, 学会通过标准曲线求样品溶液中待测定物质含量的方法。 二、 实验原理 1, 蛋白质分子中含有的肽键在碱性条件下可以与 Cu2+螯合形成蛋白质- Cu2+复合物, 即发生...
Folin-酚试剂法(福林-酚试剂法)结合了双缩脲试剂和酚试剂与蛋白质的反应,其中包括两步反应:第一步是在碱性条件下,与铜试剂作用生成蛋白质-铜络合物;第二步是此络合物将磷钼酸和磷钨酸试剂(Folin试剂)还原,生成磷钼蓝和磷钨蓝的深蓝色混合物,颜色深浅与蛋白含量成正相关。在650nm比色测定的灵敏度比双...
蛋白质在碱性溶液中其肽键与Cu2+螯合,形成蛋白质-铜复合物,与铜络合的蛋白质中所含的酪氨酸和色氨酸残基,使磷钼酸-磷钨酸(Folin-酚试剂)还原,产生蓝色化合物,在一定条件下,利用蓝色深浅与蛋白质浓度的线性关系作标准曲线并测定样品中蛋白质的浓度。 三、实验器材 试管、刻度吸管、分光光度计、坐标纸、微量加样...
由于蛋白质的量与Folin试剂呈正比,因此可以通过比色法测定蛋白质含量。 步骤: 1.准备一系列浓度的标准蛋白质溶液(从低到高),并设置空白对照。 2.取一定量的Folin试剂和样品混合,充分摇匀后静置2-3分钟。 3.用酚试剂对样品进行稀释,制备出一系列浓度的标准样品。 4.对比观察各标准样品的颜色变化,找到蛋白质浓度...
Folin-酚试剂法测定蛋白质含量是双缩脲法原理,所用的试剂是由两部分组成的.第一部分相当于双缩脲试剂,第二部分为Folin-酚试剂(磷钨酸和磷钼酸混合液).因此,反应的程序也是分两步进行的.第一步相当于双缩脲反应,在碱性条件下蛋白质中的肽键与Cu2+作用生成络合物;第二步是基于Folin试剂(磷钼酸和磷钨酸试剂)...
蓝色的深浅与蛋白质的含量成正比,可用比色法测定 二、实验仪器 1.卵清蛋白片 2.7220分光光度计 3.试管 4.移液管 三、实验试剂 1.Folin-酚试剂A:碱性铜溶液 甲液:取Na2CO32g溶于100ml0.1mol/l氢氧化钠溶液中 乙液:取CuSO4.5H2O晶体0.5g,溶于1%酒石酸钾100ml中。 临用时按甲:乙=50:1混合使用。 2....
表1-1 folin-酚试剂法定量蛋白质实验步骤 步骤 操作 1.反应体系 取6支试管编号,按下表加入试剂,混匀 空白管 标准管 样品管试剂(ml) 1 2 3 4 5 6 牛血清白蛋白标准液-0.2 0.4 0.6 0.8- 样品液0.5 蒸馏水1.0 0.8 0.6 0.4 0.2 0.5 2.双缩脲反应 向各管内分别加入碱性硫酸铜溶液2.0ml,摇匀,室温放置...
实验六 蛋白质的浓度测定――Bradford法720P xnch2002 3389 1 11:32 生化重点54-酶活力测定法之分光光度法-考研生物化学 生化老头 3034 0 15:11 室内空气中甲醛浓度的测定(AHMT分光光度法) 中岩培训工程检测 4674 2 33:01 蛋白质的定量测定 分子细胞生化 2772 0 08:24 生物化学实验-05-底物...