Folin-酚法(Lowry法)最灵敏的蛋白质测定方法之一。过去此法是应用最广泛的一种方法,由于其试剂乙的配制较为困难,近年来逐渐被考马斯亮兰法所取代。最早由Lowry确定了蛋白质浓度测定的基本步骤。以后在生物化学领域得到广泛的应用。实验原理 这种蛋白质测定法是最灵敏的方法之一。过去此法是应用最广泛的一种方法...
Folin-酚试剂法测定蛋白质含量 一、 实验目的 1, 掌握 Folin-酚试剂法测定蛋白质含量的原理及其具体实验操作技术; 2, 掌握制作标准曲线的要领; 3, 学会通过标准曲线求样品溶液中待测定物质含量的方法。 二、 实验原理 1, 蛋白质分子中含有的肽键在碱性条件下可以与 Cu2+螯合形成蛋白质- Cu2+复合物, 即发生...
由于蛋白质的量与Folin试剂呈正比,因此可以通过比色法测定蛋白质含量。 步骤: 1.准备一系列浓度的标准蛋白质溶液(从低到高),并设置空白对照。 2.取一定量的Folin试剂和样品混合,充分摇匀后静置2-3分钟。 3.用酚试剂对样品进行稀释,制备出一系列浓度的标准样品。 4.对比观察各标准样品的颜色变化,找到蛋白质浓度...
一、 目的 掌握Folin-酚法测定蛋白质含量的原理和方法,熟悉分光光度计的操作。 二、原理 Folin-酚试剂法包括两步反应:第一步是在碱性条件下,蛋白质与铜作用生成蛋白质-铜络合物;第二步是此络合物将磷钼酸-磷钨酸试剂(Folin 试剂)还原,产生深蓝色(磷钼蓝和磷钨蓝混合
2.标准蛋白质溶液:称取25mg牛血清清蛋白,溶于100mL蒸馏水中,使终浓度为250μg•mL-1。3.0.1mol•L-1磷酸缓冲液(pH7.0)。材料 各种植物材料。方法步骤-植物可溶性蛋白质含量测定(Folin-酚试剂法)-可溶性蛋白质测定 1.标准曲线的绘制 (1)取18mmX200mm试管7支,1-7编号,分别加入0、0.1、0....
蛋白质分子中酪氨酸可以和色氨酸残基(酚基)还原酚试剂(磷钨酸-磷钼酸)起 蓝色反应,此法由folin在1921年开创。 1951年,Lowry对此法进行了改进,先于标本中加碱性铜试剂,再与酚试剂反应, 提高了灵敏度。 第一步:双缩脲反应 在碱性溶液中,双缩脲(H2NOC-NH-CONH2能)与Cu2+作用,形成紫色或紫红色的络合物。即...
Folin-酚试剂法包括两步反应:第一步是在碱性条件下,蛋白质与铜作用生成蛋白质-铜络合物;第二步是此络合物将磷钼酸-磷钨酸试剂(Folin 试剂)还原,产生深蓝色(磷钼蓝和磷钨蓝混合物),颜色深浅与蛋白质含量成正比。此法操作简便,灵敏度比双缩脲法高100 倍,定量范围为5~100μg 蛋白质。Folin 试剂显色反应由酪...
Folin-酚试剂法测定蛋白质含量是双缩脲法原理,所用的试剂是由两部分组成的.第一部分相当于双缩脲试剂,第二部分为Folin-酚试剂(磷钨酸和磷钼酸混合液).因此,反应的程序也是分两步进行的.第一步相当于双缩脲反应,在碱性条件下蛋白质中的肽键与Cu2+作用生成络合物;第二步是基于Folin试剂(磷钼酸和磷钨酸试剂)...
1,蛋白质分子中含有的肽键在碱性条件下可以与 Cu2+螯合形成蛋白质Cu2+复合物,即发生双缩脲反应。而此复合物中的含酚羟基的酪氨酸或色氨酸残 基可以还原 Folin-酚试剂的磷钼酸盐-磷钨酸盐,产生蓝色化合物(钼蓝和钨蓝 的混合物),即发生 Folin-酚显色反应。同时,在碱性条件下 Folin-酚试剂极 不稳定,从而易...