Fluo-4 AM钙离子荧光探针使用步骤:1、所需试剂:※ 2 mM的 Fluo-4, AM(DMSO)试剂溶液,将1mg的Fluo-4, AM溶进442µL的DMSO中;※ Pluronic F127; Hanks balanced salt solution(HBSS)※ HEPES buffer saline(10mM HEPES,1mM Na2HPO4,137mM NaCl,5mM KCl,1mM CaCl2,0.5mM MgCl2,5mM glucose,0.1% BSA,pH...
在细胞流式技术中，Fluo-4 AM是一种常用的荧光探针，用于检测细胞内钙离子的浓度变化。掌握其正确的实验步骤是确保实验成功的关键。以下是以6孔板为例的实验步骤：准备对数生长期的细胞，进行消化并计数，调整细胞密度至1×106/ml。然后，在6孔板中接种细胞，每个组设置三个重复孔，并确保接种过程中反复混匀细胞。...
钙离子荧光探针Fluo-4,AM的使用步骤如下: 1️⃣ 首先,向Fluo-4,AM/DMSO溶液中加入16.5mg的Pluronic F127。Pluronic F127可以防止Fluo-4,AM在HBSS中聚合并帮助其进入细胞。 2️⃣ 使用HBSS稀释Fluo-4,AM溶液,制备浓度为4µM的Fluo-4,AM工作液。将此工作液加入细胞中,并在37℃下培养20分钟。 3️...
7.用激光共聚焦显微镜、荧光酶标仪、荧光分光光度计或流式细胞仪等荧光检测仪器检测Fluo-4的荧光,以确定细胞内钙离子浓度的变化。 包装清单: 产品编号 产品名称 包装 1060 Fluo-4 AM(钙离子荧光探针,2mM) 25μl 1060 说明书 1份 保存条件:-20℃避光保存,6个月有效。 注意事项:Fluo-4 AM遇水极易分解,建议...
通常用含有0.5～5μM的Fluo-4 AM的适当溶液和细胞一起在20～37℃孵育10～60分钟进行荧光探针装载,随后适当洗涤,洗涤后可以考虑适当再孵育20～30分钟以确保Fluo-4 AM在细胞内充分转变成Fluo-4。 Fluo-4 AM是最常用的检测细胞内钙离子浓度的荧光探针之一。Fluo-4 AM将Fluo-3 AM结构中的氯原子替换成了氟原子,...
二、操作步骤: 1)Fluo-4,AM母液的配制:向 Fluo-4, AM中加入适量DMSO,配制成1-5 mM的储存液,DMSO的加入量根据Fluo-4,AM(MW1096.94)分子量进行计算(如:若配制成1mM的母液,需向50 ug Fluo-4,AM中加入45.6 uL DMSO)。 【注】:溶解用的DMSO需要保证新鲜无水,否则将会导致 AM 体水解,使荧光染料无法进入...
钙荧光探针Fluo-4, AM可以作为一种高灵敏度的钙离子荧光探针。 Fluo-4, AM是一种可穿透细胞膜的荧光染料,能够检测细胞内游离钙离子的浓度。当Fluo-4与钙离子结合时,其荧光强度会显著增强,因此可以通过测量荧光强度来推算细胞内钙离子的浓度。 Fluo-4, AM具有良好的信噪比和良好的细胞膜通透性,可以在细胞内自由扩...
图1.Fluo-4 AM化学结构 Fluo-4 AM基础信息 产品名：Fluo-4, AM钙离子荧光探针；Fluo-4 AM；...
Fluo-4是一种将Fluo-3结构中的Cl替换成F的钙荧光探针。由于将Cl替换成了电子吸引力强的F,它的最大激发波长会向短波长处偏离10nm 左右。这个波长更接近于氩激光器的波长,所以用氩激光器激发时,Fluo-4 的荧光强度比Fluo-3强一倍。Fluo-4, AM穿透细胞膜进入细胞后被细胞内的酯酶剪切形成Fluo-4,从而被滞留在细...
使用荧光显微镜或荧光酶标仪还可以进行细胞内钙离子浓度的动态变化检测。Fluo-4是一种将Fluo-3结构中的Cl离子替换成F离子的钙荧光探针。由于将Cl离子替换成了电子吸引力更强的F离子,它的最大激发波长会向短波长方向偏离10 nm左右。这个波长更接近于氩激光器的波长,所以用氩激光器激发时,Fluo-4的荧光强度比Fluo-...