加入5倍体积且含有1%胎牛血清的HBSS缓冲液,继续培养约40分钟。 用HEPES缓冲液洗涤细胞3次,再用HEPES缓冲液使细胞重悬浮,制备成1×105 cells/mL溶液。 在37℃条件下培养约10分钟,然后进行荧光钙离子的检测。荧光波长:激发波长494nm,发射波长516nm。通过以上步骤,您可以利用Fluo-4 AM探针有效地检测细胞内的钙离子...
※用 HEPES buffer saline进行洗涤细胞3次后,再用 HEPES buffer saline使细胞重悬浮,制备成 1×105 cells/mL溶液。 ※ 37℃条件下培养约10分钟,再该细胞进行荧光钙离子的检测。荧光波长:激发波长494nm,发射波长516nm。 HeLa cells loaded with Fluo 4 AM Fluo-4 AM钙离子荧光探针光谱...
钙离子荧光探针Fluo-4,AM的使用步骤如下: 1️⃣ 首先,向Fluo-4,AM/DMSO溶液中加入16.5mg的Pluronic F127。Pluronic F127可以防止Fluo-4,AM在HBSS中聚合并帮助其进入细胞。 2️⃣ 使用HBSS稀释Fluo-4,AM溶液,制备浓度为4µM的Fluo-4,AM工作液。将此工作液加入细胞中,并在37℃下培养20分钟。 3️...
在细胞流式技术中,Fluo-4 AM是一种常用的荧光探针,用于检测细胞内钙离子的浓度变化。掌握其正确的实验步骤是确保实验成功的关键。以下是以6孔板为例的实验步骤:准备对数生长期的细胞,进行消化并计数,调整细胞密度至1×106/ml。然后,在6孔板中接种细胞,每个组设置三个重复孔,并确保接种过程中反复混匀细胞。...
3.加入Fluo-4 AM工作液,溶液量以能充分覆盖细胞为准。 4.20℃-37℃孵育10-60分钟进行荧光探针装载。 注:如果是首次实验不能确定孵育温度和时间,建议先尝试37℃孵育30分钟,观察荧光效果。如果细胞死亡较多,则适当缩短时间或降低温度;如果荧光强度太弱,则适当延长时间。 5.随后用PBS或HBSS洗涤3次,洗涤后可以考虑适...
Fluo-4 AM是常用的检测细胞内钙离子浓度的荧光探针,本Fluo-4 AM是配制于无水DMSO中的储存母液,浓度为2mM。 Fluo-4 AM在Fluo-3 AM的基础上改进而成,其特点是加载更快并且在相同条件下荧光更加明亮。Fluo-4 AM将Fluo-3 AM结构中的氯原子替换成了氟原子,导致它的大激发波长会向短波长处偏离12nm左右。这个波长...
图1.Fluo-4 AM化学结构 Fluo-4 AM基础信息 产品名:Fluo-4, AM钙离子荧光探针;Fluo-4 AM;...
Fluo-4钙离子检测试剂盒是一种基于Fluo-4 AM钙离子荧光探针检测细胞内钙离子浓度的试剂盒。本试剂盒可以使用荧光显微镜进行荧光成像检测,也可以使用荧光酶标仪或流式细胞仪进行荧光的定量检测。使用荧光显微镜或荧光酶标仪还可以进行细胞内钙离子浓度的动态变化检测。Fluo-4是一种将Fluo-3结构中的Cl离子替换成F离子的...
Fluo-4 AM 是一种常用的检测细胞内 Ca2+ 浓度的探针。储存方式:避光。 MCE 的所有产品仅用作科学研究或药证申报,我们不为任何个人用途提供产品和服务 NP细胞用5 μM Fura-4-AM在37°C的黑暗条件下孵育30分钟。使用特定的Ca2+敏感荧光指示剂Fura-4-AM测量细胞内Ca2+水平,并通过荧光显微镜进行分析 ...