Fluo-4 AM实验步骤: 1、所需试剂: ※ 2 mM的 Fluo-4, AM(DMSO)试剂溶液,将1mg的Fluo-4, AM溶进442µL的DMSO中; ※ Pluronic F127; Hanks balanced salt solution(HBSS) ※ HEPES buffer saline(10mM HEPES,1mM Na2HPO4,137mM NaCl,5mM KCl,1mM CaCl2,0.5mM MgCl2,5mM glucose,0.1% BSA,pH 7.4) ...
1. 细胞计数,每个样品取106个细胞(对照和实验/秒)。 2. 收集细胞(5分钟,3000×g, 4°C),在PBS中洗涤一次。 3.将细胞重悬于0.5 ml PBS中,加入0.5 μl Fluo-4-AM (1 mM原液)至终浓度为1 μM。37℃孵育1小时。 4. 用PBS洗涤细胞三次(2分钟,3000×g),最后用1ml PBS重悬。分离成2根流式细胞仪...
通常用含有0.5～5μM的Fluo-4 AM的适当溶液和细胞一起在20～37℃孵育10～60分钟进行荧光探针装载,随后适当洗涤,洗涤后可以考虑适当再孵育20～30分钟以确保Fluo-4 AM在细胞内充分转变成Fluo-4。 Fluo-4 AM是最常用的检测细胞内钙离子浓度的荧光探针之一。Fluo-4 AM将Fluo-3 AM结构中的氯原子替换成了氟原子,...
其使用方法也非常简单，只需将Fluo-4, AM溶解在DMSO中，再与细胞培养液混合即可。在细胞中应用后，Fluo-4, AM可以迅速与钙离子结合，产生强烈的荧光信号。Fluo-4, AM可以用于各种需要进行钙离子浓度检测的细胞生物学实验中。例如，在神经细胞的研究中，Fluo-4, AM可以用于检测神经递质释放时细胞内钙离子的变化；...
Fluo-4 AM；钙离子荧光探针 Fluo-4 AM 是一种可渗透细胞的荧光 Ca2+ 指示剂（Kd Ca2+ = 345 nM...
Fluo-4AM在Fluo-3AM的基础上改进而成,其特点是加载更快并且在相同条件下荧光更加明亮。Fluo-4AM将Fluo-3AM结构中的氯原子替换成了氟原子,导致它的最大激发波长会向短波长处偏离12nm左右。这个波长更接近于氩激光器的波长488nm,所以用氩激光器激发时,Fluo-4的荧光强度会比Fluo-3强一倍。由于Fluo-4与钙离子的...
Fluo-3, AM, Cell Permeant细胞膜可渗透钙离子荧光探针 在紫外-可见-近红外区有特征荧光，并且其 荧光性质（激发和发射波长、 强度、寿命、 偏振等）可随所处环境的性质，如极性、折射率、粘度等改变而灵敏地改变的一类荧光性分子。受到激发光激发后，从激发态单重态回到基态，在紫外-可见-近红外区有特征发光，...
三、百萤 钙离子荧光探针Fluo4AM实验方案 实验方案 储备溶液配制 在高质量无水DMSO制备2至5 mM 的Fluo-4 AM中储备溶液。 工作溶液配制 Fluo-4 AM工作溶液 1.在实验当天,将Fluo-4AM溶解在DMSO中,或将指示剂储备溶液的等分试样解冻至室温。 2.在含有0.04%Pluronic®F-127的缓冲液(例如Hanks和Hepes缓冲液)中...
建议您在正式实验前先摸索一下细胞量、钙离子荧光探针的终浓度、培养时间等,找到最佳实验条件。 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。 荧光染料均存在淬灭问题,请尽量注意避光,以减缓荧光淬灭。 乙酰氧基甲基酯(Acetoxymethyl ester,AM)容易吸潮,从冰箱取出后,请确认在干燥的环境放至室温后再开封。