FLP-FRT系统基因敲除系统 该系统与Cre/loxP系统相同,也是由一个重组酶 和一段特殊的DNA序列组成。从进化的角度上考虑,Flp/FRT系统是Cre/loxP系统在真核细胞内的同源系统。其中.重组酶Flp是酵母细胞内的一个由423个氨基酸组成的单体蛋白。与Cre相似,Flp发挥作用也不需要任何辅助因子,同时在不同的条件下具有良好的...
FLP是一个重组酶(flippase,Flp),类似于Cre,它识别的位点是FRT,当FRT在同一条DNA上且方向相同时,则两FRT位点之间的基因则被删除;FRT方向相反,则基因被倒转。FRT:short flippase recognition target (FRT)。 Red recombination system中的质粒pCP20(42°培养可消除)就用于表达FLP重组酶识别FRT消除抗性。
FLP is a recombinase and FRT defines target sites of transposable elements (see Fig. F30 ). The system is very similar to the Cre-loxP of bacteriophage P1. The 43-kDa "flip" (FLP) is encoded by the 2渭 circular yeast plasmid. Recombination (X) takes place within the core sequence ...
本发明基于双转基因和Flp-Frt技术对传统的Cre转基因技术进行了创新。在 Cre的翻译起始密码子前加入一个“STOP “原件,可以抑制下游Cre的表达。在“STOP “原件的上下游各加上一个FRT序列。其次,利用FLP重组酶,可以特异的删除两个FRT序列间的“STOP“原件,这时其下游的Cre重组酶可以表达。具体应用时在Cre和Flp的表...
实验理论 FLP FRT 重组系统与Mosaic杂交实验 1(上) 《遗传学实验》是北京大学生命科学学院本科生必修课程。随着许多新技术和新理念的出现,生物学研究突飞猛进,成果累累。面对这些眼花缭乱的技术和理念,北京大学的遗传学实验,以研究基因的功能为目的,主要以模式动物果
从进化的角度上考虑,Flp/FRT系统是Cre/loxP系统在真核细胞内的同源系统。其中.重组酶Flp是酵母细胞内的一个由423个氨基酸组成的单体蛋白。与Cre相似,Flp发挥作用也不需要任何辅助因子,同时在不同的条件下具有良好的稳定性。该系统的另一个成分Flp识别位点(Flp recognition target,FRT)与loxP位点非常相似,同样由两个...
目前,Cre/LoxP、Flp/FRT重组系统是常用的条件性基因敲除方法。Cre/LoxP系统由Cre重组酶和LoxP位点组成。Cre重组酶能识别并切割特定的DNA序列(LoxP位点),介导基因序列的删除或重组。这一系统具有高效、特异性和灵活性,使研究人员能够对特定基因进行条件性敲除或敲入,以研究其在特定组织或时间点的功能。
摘要:地衣芽胞杆菌有效的基因编辑工具有限,为了拓展和丰富其基因编辑手段,在地衣芽胞杆菌中构建一个抗性标记可重复使用的FLP/FRT基因编辑系统,并通过敲除α-淀粉酶基因amyL、蛋白酶基因aprE及敲入外源透明颤菌血红蛋白基因vgb对该系统进行初步验证。首先以温敏质粒pNZT1为载体分别构建amyL和aprE基因敲除质粒pNZTT-AFKF和...
摘要:来源于酵母2 μm质粒的FLP/FRT位点特异性重组系统已经被广泛应用于拟南芥、水稻、小鼠、果蝇、线虫等高等真核模式生物,正逐渐成为转基因动植物研究领域进行基因操作的强有力工具。笔者综述了FLP/FRT系统的重组原理及其在高等真核生物中的应用,系统地概述了该系统在转基因植物、哺乳动物、昆虫以及其它相关高等真核...
实验理论 FLP FRT 重组系统与Mosaic杂交实验 1(下) 《遗传学实验》是北京大学生命科学学院本科生必修课程。随着许多新技术和新理念的出现,生物学研究突飞猛进,成果累累。面对这些眼花缭乱的技术和理念,北京大学的遗传学实验,以研究基因的功能为目的,主要以模式动物果