Annexin V-FITC 单染组:用于确定 Annexin V 的阳性阈值。荧光显微镜检测 1. 离心后用少量 Binding Buffer 重悬细胞,涂片。2. 在荧光显微镜下观察,通常 Annexin V-FITC 发出绿色荧光,PI 发出红色荧光。3. 可以通过拍照或计数来定量分析凋亡细胞的比例。注意事项 1. 整个操作过程中应尽量保持低温,以减少细胞代...
根据Annexin V-FITC/PI凋亡检测试剂盒(BD,#556420):1. 收集要用于细胞凋亡检测的细胞:离心(1000rpm,5min),去除培养基。2. PBS洗1次后,重悬于1×Binding Buffer中(将10×Binding Buffer用蒸馏水稀释)。其中对照用400μL 1×Binding Buffer,其它处理组用100μL 1×Binding Buffer。3. 取出100μL...
PI是一种经济、稳定的核酸染料,它不能透过正常细胞或早期凋亡细胞的完整的细胞膜,但可以透过凋亡晚期和坏死细胞的细胞膜而使细胞核染红。 将Annexin V与PI联合使用时,PI被排除在活细胞和早期凋亡细胞之外,而晚期凋亡细胞和坏死细胞同时被FITC和PI结合染色呈现双阳性。 实验材料准备 Annexin V-FITC/PI细胞凋亡检测试剂...
产品名称 Annexin V-FITC/PI细胞凋亡检测试剂盒 产品规格 25 rxns 50 rxns 型号 FA101-01 用途范围 用于科研 是否进口 否 加工定制 否 英文名称 Annexin V-FITC/PI Cell Apoptosis Detection Kit 保存条件 2~8℃避光保存 效期 一年 产地 中国 质检 通过质检 售卖区域 全国 服务 具体服务请咨询百奥...
流式fitc和pi四象限实验是基于细胞状况的荧光信号来进行分析,首先通过FITC和PI染色将细胞分类,然后在流式细胞仪中进行检测得到荧光信号。 2、步骤 (1)取相应数量的细胞,进行细胞处理,并用PBS冲洗一次去除培养基和残留药物等。 (2)将细胞溶解液均匀加入每个实验管中,加入FITC染液和PI染液,使细胞达到充分染色。 (3...
细胞凋亡是细胞程序性死亡的一种形式,对于维持生物体的正常生理功能至关重要。Annexin V-FITC/PI双染法是一种常用的细胞凋亡检测技术,能够有效区分早期凋亡细胞和坏死细胞。这一方法利用了Annexin V与细胞膜磷脂的结合特性以及碘化丙啶(PI)对细胞膜完整性的指示作用,从而实现对细胞凋亡的精确检测。在Annexin V-...
加入5μL Annexin V-FITC,轻轻吹打混匀,加入5μL PI 轻轻吹打混匀,室温避光孵育5-15min。(PI染色时间过长有可能造成检测的凋亡率偏高,时间允许,可以在检测前5分钟加入PI); 5 流式细胞仪检测或荧光显微镜观察。最好在1h内检测。 四、注意事项1Annexin V-FITC与PI量微,请在使用前低速离心将盖内壁上的液体甩...
FITC是一种荧光染料,具有异硫氰酸基(–N=C=S),能够与氨基酸中的氨基(–NH2)反应,形成共价结合。FITC在488 nm激发波长下发射绿色荧光,适合用于荧光显微镜和流式细胞术分析。合成与标记方法 FITC标记过程:溶解肽:将11-L-氨基酸肽PI溶解在碱性缓冲液中(如碳酸氢钠缓冲液,pH 8.5-9.0),以激活其氨基...
Annexin V-FITC:在细胞凋亡的早期,PS从细胞膜内侧翻转到外侧。Annexin V是 一种与PS高亲和力结合的蛋白质,能够标记外翻的PS,从而检测早期凋亡细胞。 PI染色:PI是一种能够进入膜完整性已受损的细胞的染料。由于活细胞和早期凋亡 细胞的膜完整性较好,PI无法进入,因此这些细胞对PI是阴性的。
Annexin V-FITC/PI法的原理: 正常细胞(活细胞)具有完好的细胞膜,此时细胞膜的组分之一——磷脂酰丝氨酸(phosphotidylserine,PS)位于细胞膜的内侧,当细胞发生凋亡时,细胞膜的结构发生改变,这使得原本在细胞膜内侧的PS外翻到细胞膜的表面,这种现象在凋亡的早期就会出现,因此就可以用与PS具有高亲和力、标记了...