有了内参才可以量化目的蛋白的表达,是WB、IF实验结果进行定量分析或定性比较的重要参考标尺。常见内参蛋白包括 Actin、Tubulin、GAPDH、Histone H3 等,但研究不同类型的蛋白时,内参并不是随意选择的,如胞浆蛋白的内参与胞核蛋白的内参是不一样的,前者常用GAPDH、tubulin、actin等,后者常用Histone H、PCNA等;并且尽量...
有了内参才可以量化目的蛋白的表达,是WB、IF实验结果进行定量分析或定性比较的重要参考标尺。常见内参蛋白包括 Actin、Tubulin、GAPDH、Histone H3 等,但研究不同类型的蛋白时,内参并不是随意选择的,如胞浆蛋白的内参与胞核蛋白的内参是不一样的,前者常用GAPDH、tubulin、actin等,后者常用Histone H、PCNA等;并且尽量...
冰冻切片荧光探针原位..一、实验器材及试剂1、实验器材名称厂家型号冰冻切片机ThermoCryotome E原位杂交用载玻片Servicebio盖玻片原位杂交用离心管江苏世泰实验器材有限公司AXYGEN10212432C摇床
实验流程 石蜡切片荧光探针原位杂交与免疫荧光双标实验步骤 1. 组织固定、脱水、切片、石蜡切片脱蜡至水; 2. 消化:切片于修复液中煮沸10-15分钟,滴加蛋白酶K消化; 3. 预杂交:滴加预杂交液,37°C孵育1h。 4. 杂交:倾去预杂交液,滴加含探针 杂交液, 浓度 ,恒温箱 度杂交过夜。
原位杂交原理:原位杂交是指将特定标记的已知顺序核酸为探针与细胞或组织切片中核酸进行杂交,从而对特定核酸顺序进行精确定量定位的过程。原位杂交可以在细胞标本或组织标本上进行。IF即免疫荧光,可检测组织或细胞中某蛋白的表达情况及定位。 原位杂交(FISH、IF双标)可以检测靶基因与靶蛋白的共定位情况。
Fish IF共染实验步骤 1、组织固定:组织取出洗净后立即放入固定液(DEPC水配制)中固定2-12h。 2、脱水:组织固定完成后经梯度酒精脱水后浸蜡,包埋。 3、切片:石蜡经切片机切片,摊片机捞片,62°烤箱烤片2h。 4、石蜡切片脱蜡至水:依次将切片放入二甲苯Ⅰ15min-二甲苯Ⅱ15min-无水乙醇Ⅰ5min-无水乙醇Ⅱ5min-...
原位杂交(FISH、FISH、IF三染), 原位杂交与免疫荧光原理:原位杂交是指将特定标记的已知顺序核酸为探针与细胞或组织切片中核酸进行杂交,从而对特定核酸顺序进行精确定量定位的过程。原位杂交可以在细胞标本或组织标本上进行。免疫荧光就是将不影响抗原抗体活性的荧光
IF/FISH双标实验流程:Box 2&3→实验步骤1-2→Box 1→实验步骤13-20 ISH和FISH实验流程:Box 2&3→实验步骤1-20 Box.1 IF/FISH●5d 图2. IF和FISH检测结果图 组织制备及一抗孵育●5小时+过夜 (1)解剖卵巢后(步骤2),弃去EBR试剂(余量略微覆盖卵巢,使其不会变干),采用500 µl(或足够量)的PBT稀释...
荧光原位杂交(Fluorescence in situ hybridization,FISH)是20世纪80年代末在放射性原位杂交技术基础上发展起来的一种非放射性分子生物学和细胞遗传学结合的新技术,是以荧光标记取代同位素标记而形成的一种新的原位杂交方法。IF即免疫荧光,可检测组织或细胞中某蛋白的表达情况及定位。
原位杂交(FISH、IF双标)可以检测靶基因与靶蛋白的共定位情况。 货号名称规格价格(元) FY-07221原位杂交(FISH、IF双染)张300 实验结果展示: 实验流程: 石蜡切片荧光探针原位杂交与免疫荧光双标实验步骤 1、组织固定:组织取出洗净后立即放入固定液(DEPC水配制)中固定2-12h。