一、FISH质量影响因素分析 1. 实验条件和人员培训 建立FISH技术平台,除需要一间可以进行荧光实验操作和显微观察暗室外,还需要原位杂交仪、荧光显微镜、显微镜滤光片、水浴箱、漩涡混合器、普通离心机、移液器、FISH探针试剂盒、无水乙醇、二甲苯、去离子水、橡胶水泥、透明指甲油等设备和试剂。 由于FISH检测具有敏感性...
肿瘤FISH检测指的是荧光原位杂交检测,其检测结果为阴性说明HER-2基因无扩增。 荧光原位杂交检测是指将被荧光素标记的核酸探针与待测样本中的核酸序列配对,然后在荧光显微镜下进行检测。若患者确诊为乳腺癌,可进一步利用荧光原位杂交检测来检测乳腺癌的HER-2是阳性或阴性。如果荧光原位杂交检测的结果为阴性,说明HER-2基...
规则1:如果使用的FISH探针位于不同编号的染色体上,应按照X,Y,1-22的顺序列出。 规则2:如果使用的FISH探针位于同一编号的染色体上,应按照从pter→qter的方向描述。 规则3:对于同一基因的5'端和3'端,描述顺序应按照从pter→qter的方向描述。 规则4:多次杂交结果,计数细胞相同时,可以将探针写入同一括号内。 规则5...
在解读乳腺癌har-2基因荧光原位杂交(FISH)检测报告时,关键在于比较红色信号和绿色信号的数量。具体而言,如果红色信号的数量少于绿色信号,且两者之比低于1.8,则报告为阴性,意味着未检测到基因的扩增现象。相反,若红色信号数量超过绿色信号,且两者之比大于2.2,则报告为阳性,表明存在基因扩增。这种...
FISH技术广泛应用于生物学和医学领域,包括细胞遗传学、肿瘤生物学、基因定位和产前诊断等。其优点在于灵敏度高、特异性强、定位明确且结果客观。然而,FISH实验结果的质量受多种因素影响。这些因素包括实验条件、人员培训、固定液的选择、组织切片和载玻片的选择、切片预处理、变性和杂交步骤、杂交后洗涤、...
荧光原位杂交(FISH)是利用探针直接与染色体进行杂交,从而将特定的基因在染色体上进行定位的一种现代生物学技术。现利用该技术对果蝇的某些基因与染色体进行分析(结果如图)。
FISH实验结果的质量受到多种因素的影响,包括实验条件、人员培训、固定液的选择及固定时间、组织切片和载玻片的选择、切片的预处理、变性和杂交、杂交后洗涤温度、时间和封片保存、对照设置等。建立FISH技术平台时,需要准备一套完整的设备和试剂,包括原位杂交仪、荧光显微镜、显微镜滤光片、水浴箱、漩涡混合...
FISH荧光原位杂交: 生命科学中的“钓鱼” 应用荧光染料标记的DNA/RNA探针,根据碱基互补配对的原则,与变性后的染色体或细胞核靶核酸杂交,在荧光显微镜下观察并记录结果。 图6 FISH探针的种类: 单色探针(single color probe,SC) 双色探针(dual color probe,DC) ...
目前BRAF融合基因检测的方法主要包括荧光原位杂交(FISH)、rt-PCR、下一代测序等。由于KIAA1549-BRAF有多种外显子(也有内含子)融合方式,rt-PCR需要设计多对引物扩增、测序,实施起来相对复杂;而尽管NGS可检测到具体融合方式,但检测时间相对较长、费用相对较高,因此目前病理诊断时仍是优先采用相对便捷、费用较低的FISH...
结果是红色和绿色信号值的比较,如果红色信号数比绿色信号值低于1.8就是阴性,证明没发生扩增,大于2.2就是阳性,发生了扩增。愿健康