配置相对应的反应体系,轻轻混合均匀后置于PCR仪中进行反应,反应条件依据产物而定。琼脂糖凝胶验证PCR结构并回收产物。 PCR产物与载体进行同源重组 使用的重组酶(Exnase II)完成重组,根据反应体系(10μl体系,见下表)进行混合配置,37℃金属浴15-30min,随后冰上冷却2min立即转化 总体系 10μl 酶切后的载体DNA 50ng...
ClonExpress ® II是新一代的重组克隆试剂盒,该试剂盒中包含有重组反应所需缓冲液和重组酶Exnase ® II。和上一代产品相比,Exnase ® II中添加了独特的重组增强因子。一方面,这种增强因子可以显著提高重组克隆效率,即便使用低效率感受态细胞(10 7 cfu/μg)也可实现高效克隆(100 cfu/ng Vector)。另一方面,E...
这种两端带有载体末端序列的 PCR 产物和线性化载体按一定比例混合后,在Exnase®II 重组酶的催化下,仅需反应 30 min 即可进行转化,完成定向克隆,阳性率可达 95% 以上。 组分 C112-01 (25 rxn) C112-02 (50 rxn) 5× CE II Buffer 100 μl 200 μl...
ClonExpress技术是一种简单、快速并且高效的 DNA 无缝克隆技术,可将插入片段定向克隆至任意载体的任意位点。 ClonExpress®II 是新一代重组克隆试剂盒,包含增强的重组酶 Exnase®II。使用任意方式将载体进行线性化;在插入片段正 / 反向 PCR 引物 5’ 端引入线性化载体的末端序列,使得 PCR 产物 5’ 和 3’ 最...