ELISA实验常见问题1.检测无信号 （1）HRP受到污染 解决方法：使用新配制的试剂 （2）抗体用量不足 解决方法：增加抗体用量或浓度 （3）试剂添加有误 解决方法：重新进行实验 ELISA实验常见问题2.高背景信号 （1）洗板不充分 解决方法：增加洗涤次数；确保在洗涤前清除所有残留抗体溶液 （2）封闭不充分 解决方法：...
在进行ELISA实验时,可能会遇到一些常见问题,下面我们一起来看看这些问题的原因和解决方法吧。 阴性对照出现阳性结果 📊 样品或试剂被污染:如果样品或试剂被污染,或者加样时操作不当导致溶液溅洒到相邻孔,可能会出现交叉污染。解决方法是更换试剂,并小心操作。 酶标板洗涤不彻底:洗板前要将抗体溶液倒干净,然后加入足够...
2. 试剂盒使用前室温平衡: 温度是ELISA结合反应的重要影响因素,为使所有样本在一致的温度下反应,实验前务必将所有的试剂平衡至室温,包括检测样本,避免因温度的动力学反应差异而导致ELISA检测结果的不准确。 3. 标准品的溶解与稀释,严格按说明书要求进行。 ELISA标准曲线是结果计算的尺子,标准品是ELISA实验成功与否的...
可能原因：抗体非特异性结合、底物溶液污染、孵育过程未避光。解决方法：使用封闭液封闭非特异性结合位点，适当稀释底物溶液，确保孵育过程避光。三、复孔之间重复性差：可能原因：加样时间不一致、加样量不准确、洗涤条件不一致。解决方法：保持加样时间一致，使用同一移液枪确保加样量准确，保持洗涤条件一致。四、吸...
二、ELISA常见问题1. 阴性对照孔与空白孔的OD值偏高在ELISA实验中，阴性对照孔和空白孔的OD值应保持在一定范围内。如果OD值偏高，可能会影响实验结果的判定。这可能是由于血清标本中存在非特异性抗体或蛋白质引起的。2. 重复孔之间差异较大ELISA实验要求重复孔之间的一致性较好。如果重复孔之间差异较大，说明实验的重复...
一、ELISA板子划板现象：在ELISA实验中，经常会遇到板子划板的问题，这主要表现在包被酶标板的聚苯乙烯（PS）底板上出现弯曲或不规则划痕。原因：1. 酶标板在运输过程中受到剧烈震动。2. 酶标板叠放或摆放不平整。3. 包被不均匀。解决方案：1. 在运输过程中尽量减少震动，最好使用防震包装。2. 酶标板应平整叠放...
一般来说,ELISA可分为四大类:直接ELISA、间接ELISA、夹心ELISA、竞争抑制ELISA。其他的ELISA基本上都隶属于这四类ELISA或由这四类ELISA组合衍生而来。 尽管不同类型的ELISA实验原理及具体步骤不尽相同,其中存在的许多问题却是相同或类似的,应关注的细节也大致相同。这些问题/细节对检测效果影响较大,或者可能导致假阳性...
ELISA实验中常见的问题及解决方案如下: 1.阴性对照孔与空白孔的OD值偏高:这可能是由于血清标本中存在非特异性抗体或蛋白质引起的。解决方案是尽量减少血清标本中非特异性抗体的干扰,如使用稀释液、清洗液等。 2…
6、在使用ELISA试剂盒时应注意:2-8℃保存(特殊情况除外)、同一品种不同批号试剂不能混用、不同品种试剂盒显色剂不能混用。 常见问题及分析 1、阳性对照不显色 漏加阳性对照 阳性对照孔忘加酶或忘加显色剂 阳性对照受污染 2、阳性对照显色浅(HBeAb HBcAb阴...