在进行ELISA实验时,可能会遇到一些常见问题,下面我们一起来看看这些问题的原因和解决方法吧。 阴性对照出现阳性结果 📊 样品或试剂被污染:如果样品或试剂被污染,或者加样时操作不当导致溶液溅洒到相邻孔,可能会出现交叉污染。解决方法是更换试剂,并小心操作。 酶标板洗涤不彻底:洗板前要将抗体溶液倒干净,然后加入足够...
可能原因：试剂污染、操作不当、洗板不彻底。解决方法：更换新试剂，小心操作避免污染，确保洗板彻底。二、酶标板整体背景高：可能原因：抗体非特异性结合、底物溶液污染、孵育过程未避光。解决方法：使用封闭液封闭非特异性结合位点，适当稀释底物溶液，确保孵育过程避光。三、复孔之间重复性差：可能原因：加样时间不一...
可能原因:洗涤液浓度不当、洗涤时间不足或过长、洗涤次数不够等。 解决方案:按照说明书要求调整洗涤液浓度、洗涤时间和次数。 🔧 移液器问题: 可能原因:移液器不准确、吸嘴内壁挂水、吸嘴不清洁等。 解决方案:定期校准移液器、使用配套吸嘴、确保吸嘴内壁清洁。在进行ELISA实验时,注意细节和标准化操作流程是非...
如果有区别则阳性结果为浅兰色）。三、Elisa实验常见问题及解决方法1. 实验结果重复性差（1）原因：操作过程中出现误差、试剂盒质量差、试剂保存不当等。（2）解决方法：严格按照操作步骤进行实验；选择质量好的试剂盒；正确保存试剂盒。2. 实验结果出现假阳性或假阴性（1）原因：样本中存在干扰物质；试剂盒质量差...
问题一：高背景或阴性对照值偏高 问题二：阳性对照值偏低或低吸光度 问题三：边缘效应 问题四：标准曲线不佳 问题五：标准曲标准曲线良好，但样本无检测信号 问题六：重复性较差 问题七：假阳性反应 问题八：整块板产生阳性OD值或整个板显蓝色 问题九：整块板OD值偏低 问题十：显色缓慢 ...
常见问题 ELISA实验对初学者而言,如不注意实验操作过程中的各个环节,可能会出现白板,显色弱灵敏度低,花板无梯度背景高等现象。下面对以上实验现象进行解析。 1、白板现象:所有孔的颜色均为无色,即无信号呈现。 可能原因:试剂已过保质期,不同批次稀释液交叉使用; ...
酶联免疫吸附剂检测(enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)又称酵素免疫分析法,是一种特殊的酶免疫测定 (EIA) 类型,可使用抗体定量某种目标分子。抗体用于特异性检测分析物(例如肽、蛋白、抗体、小分子)。酶(例如辣根过氧化物酶 (HRP))直接或间接偶联该抗体,从而提供检测方法并可能扩增信号。
(1)温育是ELISA测定中影响测定成败最为关键的一个因素。ELISA作为一种固相免疫测定,抗原抗体的结合反应在固相上进行,要使液相中的抗原或抗体与固相上的特异抗体或抗原完全结合,必须在一定的温度条件下反应一定的时间。温育所需时间与温度成反比,即温度越高,则所需时间相对...
一、ELISA实验结果显色淡、 灵敏度偏低 可能原因与具体解决办法如下: 1、试剂盒在运输途中时间太长,温度太高 解决办法:尽量缩短运输时间,夏季应放冰块降温 2、试剂盒未充分平衡 解决办法:试剂盒从2～8℃冰箱取出后打开盒盖,于室温平衡至少 20分钟,确保所有试剂已平衡至室温(约25℃) 。
ELISA实验中的常见问题及解决方法 问题可能原因解决方法 高背景或阴性对照只偏高阴性对照孔被阳性对照货样品污染洗涤时,勿将洗液溢出孔外 抗体非特异性结合封闭液不合适,更换封闭液 酶结合物过浓请检查酶结合物是否按说明书规定稀释 孵育温度过高检查孵育箱的温度是否正确、稳定 ...