目前常用的ELISA方法有直接法、间接法、双抗夹心法、竞争法ELISA。 #01直接法 将抗原固定于ELISA板上,然后用酶标抗体直检测抗原。 相较于其他类型的ELISA实验,直接ELISA实验步骤少,检测速度快,不需要用到二抗,避免了交叉反应,检测结果不容易出错, 但是由于直接ELISA的抗原不是特异性固定的,样本中的靶蛋白及其他杂质...
文章开头介绍ELISA是一种免疫测定方法，它是基于板检测技术。ELISA利用特异性抗体（或抗原）捕获样品中的目标抗原（或抗体），并利用酶和底物的反应检测/定量目标分子方法。根据抗原抗体组合，该检测称为直接ELISA、间接ELISA、夹心ELISA和竞争ELISA。ELISA检测方法 直接ELISA法 在直接ELISA法中，将已知抗原以特异性方式...
一、间接ELISA法 间接ELISA法是最常用的ELISA方法之一。其基本原理是将抗原固定在固相载体上,加入待测样本后,如果样本中存在特异性抗体,则与抗原结合形成抗原-抗体复合物。随后加入酶标记的二抗(针对一抗的抗体),与一抗结合形成酶标二抗-一抗-抗原复合物。最后加入底物,酶催化底物发生显色反应,根据颜色的深浅程度可...
间接法ELISA 是检测抗体最常用的方法，原理为利用酶标记的二抗以检测已与固相结合的受检抗体，显色测定。优势在于待测一抗无需标记快速便捷。直接法ELISA与间接法ELISA相似，区别在于一抗酶标，检测孵育也以抗原为主，但直接法ELISA的灵敏度有限，需权衡使用。夹心法ELISA又分为双抗原夹心法和双抗体夹心法ELISA，原理...
酶联免疫吸附测定(enzyme linked immunosorbent assay,ELISA)指将可溶性的抗原或抗体结合到聚苯乙烯等固相载体上,利用抗原抗体特异性结合进行免疫反应的定性和定量检测方法。 ELISA实验生物灵敏度高,特异性强,安全可靠,是免疫学中的经典实验,丁香实验在这里为大家准备了ELISA...
Elisa检测方法 一、直接法 在直接ELISA中,抗原或样品直接固定在板上,结合的检测抗体与目标蛋白结合。然后添加底物,产生与样品中分析物量成比例的信号。由于直接ELISA中仅使用一种抗体,因此其特异性不如夹心ELISA。 图片来源网络 优点:ELISA实验步骤少,检测速度快 ...
根据试剂的来源和标本的情况以及检测具体条件, 可设计出各种不同类型的检测方法。用于临床检验的 ELISA 主要有以下几种类型: (一)双抗体夹心法 1、双抗体夹心法检测抗原 操作步骤如下: 1)将特异性抗体与固相载体结合,形成固相抗体。洗涤除去尚未结 合的抗体及...
一、直接ELISA直接ELISA是一种直接检测目标物质的ELISA方法。在直接ELISA中，将特异性抗体直接固定在酶标板上，然后加入标准品或生物样品，使其与抗体结合。加入酶标二抗，使其与特异性抗体结合，形成酶标二抗-特异性抗体-目标物质的复合物。最后加入底物，根据颜色反应程度对目标物质进行定量分析。直接ELISA的优点是操作...
双抗原夹心ELISA 反应模式与双抗体夹心法类似。将固相抗原和酶标特异性抗原分别取代固相抗体和酶标特异性抗体，就可用双抗原夹心法测定样品中的抗体。优点：该方法不受非特异性IgG的干扰，背景干扰小，受检抗体不需要稀释。缺点：技术难度较高，需要制备高质量的酶标抗原。相信大家现在已经了解了ELISA的基本原理及方法学...