(1)将含羧基的反应物(蛋白、酶、抗体等)溶解在50mM MES,500 mM NaCl,pH=6.0的缓冲体系中,推荐浓度为1mg/mL; (2)快速向上述反应液中加入EDC和NHSS,推荐浓度为EDC 2mM,NHSS 5mM。也可以通过配置高浓度的EDC和NHSS母液,再通过移取小体积的EDC/NHSS母液加入到反应液中达到最终的EDC和NHSS推荐浓度。 (3)室...
大佬们帮看看,edc..我是材料专业的,化学小白。我的材料表面有氨基(nmol/cm2级别的),然后聚合物是一个有含氟的末端端基是羧基的聚合物。我想通过edc-nhs活化来把聚合物接到氨基表面。目前聚合物在四氢呋喃里溶解性好
因此,在羧基微球的抗体标记过程中,建议根据实际情况对比和选择一步法或两步法。若有必要,可选用包含NHS或Sulfo-NHS的两步法,以实现更理想的标记效果。图3展示了在Sulfo-NHS的存在下,由EDC介导的偶联反应。在实验过程中,EDC和NHS的用量是关键。EDC的活化浓度需与微球的表面羧基含量相匹配,通常,按照微球表面羧...
NHS用量Pierce推荐为EDC量的2.5倍,实际应用为EDC用量的2~5倍即可,根据EDC的用量为0.01ml。NHS用量=0.01*5=0.05ml 以上的用量计算是经过实际实验验证过的,可直接用于实际标记,为了方便计算我们可以制作个计算模板,方便每次标记后量的计算。模板中插入有详细计算公式:如需模板在评论区留言哦!
nhs,edc酰胺化反应条件 NHS和EDC酰胺化反应条件如下: 1.反应物:NHS、EDC和含有羧基的化合物(如氨基酸、肽、蛋白质等)。 2.溶液条件:一般在酸性或中性条件下进行(pH值为4.5-6),反应溶液需保持冷却。 3.反应时间:一般需要2-4小时,具体时间取决于反应物的种类和浓度。 4.产物提取:反应完成后,产物一般需要进行...
NHS,即N-Hydroxysuccinimide,是一种有机化合物,常见的晶体为白色结晶粉末。它是一种无色结晶,在水中可溶,可以催化羧基化合物与胺化合物反应生成酰胺结构。 下面将详细介绍EDC和NHS的结构以及它们在活化羧基化学式中的应用。 1. EDC的结构和应用: EDC的分子式为C8H17N3,结构中包含一个酰脲基和一个烷基。EDC的主...
EDC偶联方案中通常包含N-羟基琥珀酰亚胺(NHS)或其水溶性类似物(Sulfo-NHS),以提高效率或生成干燥条件下稳定的(氨基反应性)中间体(图5)。EDC使NHS与羧基偶联,形成比O-酰基异脲中间体稳定许多的NHS酯,同时允许在生理pH下与伯胺有效偶联。 图5. 使用碳二...
Slufo-NHS是NHS的一种水溶性磺化类似物,用于蛋白的交联实验。 Sulfo-NHS的特点:① Sulfo-NHS提高EDC介导的偶联效率;② 能够利用任何含羧基分子形成氨基反应性Sulfo-NHS酯;③ Sulfo-NHS衍生物通常直接溶于水(可直接加入生理缓冲液中),不可穿透细胞膜(可用于标记细...
NHS是N-羟基琥珀酰亚胺的缩写,EDC是1-乙基-3-(3-二甲氨基丙基)碳二亚胺的缩写。它们通常被用于将含有羧基的化合物与氨基化合物偶联。在偶联反应中,NHS和EDC的作用是将羧基和氨基化合物连接在一起,形成一个稳定的酰胺键。NHS和EDC偶联原理的关键步骤是首先将EDC激活,生成活化的EDC中间体。然后,NHS与活化的...
NHS和EDC是两种常见的偶联化学反应。NHS是N-羟基丁二酰亚胺的缩写,是一种常见的偶联试剂,用于与胺基化合物发生反应。而EDC是1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基卡巴朴胺,也是一种常用的偶联剂,用于将羧酸与胺基或酚发生反应。 NHS和EDC都是重要的化学反应试剂,它们在生物化学、化学生物学和生物医学领域中得到广泛应用。