(A) 采用抗-HER2和抗-HER3一抗进行Duolink® PLA,它们经优化可产生单独的PLA信号,显示HER2/HER3的相互作用。(B) 仅采用抗-HER2一抗进行Duolink® PLA。由Pantomics Inc.通过IHC而评分为2+的HER2受体丰度可导致PLA信号的重合。(C) 阴性对照(无一抗)。PLA信号显示为红褐色;核为蓝色。 明场图像通常拍摄在...
现在有几种图像分析工具可用于量化PLA信号。可以对图像数据进行分析得到每个细胞或细胞内每个区域的PLA信号的平均荧光强度和/或PLA信号总数（参见图3）。报告的定量数据是给定实验中相对于技术和/或生物对照的数据。然而，只有在PLA信号未融合并且图像像素未饱和的情况下，才可能进行可靠的量化。您的实验是否需要额外的定...
洗涤缓冲液A应在开始测定之前制备，将一小袋内容物溶解在高纯度纯水中，定容1,000 mL。溶液可在室温短期（最长两周）储存或 4°C长期储存。说明：使用前将溶液升温至室温。许多Duolink® PLA试剂以浓缩原液形式提供，在使用前立即稀释。请勿储存稀释后的Duolink® PLA试剂。Duolink® PLA明场实验方案 在开始...
选择读出方法的关键考虑因素是专用设备的可用性。荧光显微镜是 Duolink® PLA 实验最常用的读出设备。上述所有样品类型均可与荧光Duolink® PLA 试剂一起使用，不过，部分样品会表现出明显的自发荧光。如果发生这种情况或当荧光仪器不可用时，可用光学显微镜进行明场Duolink® PLA实验。流式细胞术方案对于仪器类型是...
duolink pla荧光实验方案 Duolink PLA (Proximity Ligation Assay)是一种用于检测蛋白质互作的荧光实验技术。该技术使用特定的荧光标记探针来检测两个靠近的蛋白质分子之间的相互作用。 实验步骤如下: 1.细胞处理:首先,处理您要研究的细胞。您可以使用适用于您研究的细胞类型的特定处理方法。这可能包括对细胞进行激活...
Duolink® PLA实验方案 一、封闭 1.涡旋Duolink®封闭液。 2.在每个1cm2样品上添加1滴(~40 μL)Duolink®封闭液。确保封闭液要覆盖整个样品。 3.将载玻片置于加热湿度箱中37℃孵育60分钟。 二、孵育一抗在添加抗体之前请勿让载玻片干燥,否则会导致背景。
3. Duolink PLA实验操作 9.清洗载玻片:使用洗涤缓冲液洗涤载玻片,去除非特异性结合和杂质。 10.阻断非特异性结合:将阻断剂加入载玻片中,阻断非特异性结合位点。 11.加入第一对抗体:将第一对用于检测相互作用的抗体加入载玻片中,与目标蛋白质发生特异性结合。 12.加入双抗体:加入连接两个抗体的双抗体,形成连接...
要设计一个成功的Duolink® PLA实验,必须考虑很多因素。这些因素包括但不限于: · 确定蛋白质靶标和实验类型 · 选择样品(细胞或组织) · 设计您的读出方案 · 设计实验对照(技术和生物) 靶标识别 首先要确定的是目标蛋白靶标。是单一蛋白质表达,蛋白质与蛋白质的相互作用 (PPI),还是蛋白质翻译后修饰 (PTM...
一次完整的 Duolink®实验,需要以下试剂:两个一抗(识别目标蛋白)、一对PLA探针(根据一抗的生物来源进行选择)、检测试剂(明场或不同荧光基团标记)、封片剂、洗涤缓冲液。Duolink®实验需要的细胞或组织的最小和最大样本量是多少?a)细胞样本:原则上,Duolink®需要的最...
DuoLink PLA 原理科研科普两不误 立即播放 打开App,流畅又高清100+个相关视频 更多404 -- 4:09 App Duolink®邻位连接检测操作视频 7390 -- 2:31 App 建议佩戴耳机享用! 8128 1 2:08 App 一灯多用?FSB、PLA同款信号灯?解决你全身的信号标识需求[NITECORE NU系列信号灯] 1285 4 2:05 App [F1meme]...