现在有几种图像分析工具可用于量化PLA信号。可以对图像数据进行分析得到每个细胞或细胞内每个区域的PLA信号的平均荧光强度和/或PLA信号总数（参见图3）。报告的定量数据是给定实验中相对于技术和/或生物对照的数据。然而，只有在PLA信号未融合并且图像像素未饱和的情况下，才可能进行可靠的量化。您的实验是否需要额外的定...
•实验试剂和缓冲液:如洗涤缓冲液、荧光显影缓冲液等。 2. 样品处理和固定 5.准备目标蛋白质样品,确保其浓度和纯度。 6.将目标蛋白质样品加入到含有适当浓度的缓冲液中,使其达到所需浓度。 7.使用离心机将样品离心,去除杂质。 8.将样品固定在载玻片上,可以通过离心或者固定剂进行固定。 3. Duolink PLA实验操...
duolink pla荧光实验方案 Duolink PLA (Proximity Ligation Assay)是一种用于检测蛋白质互作的荧光实验技术。该技术使用特定的荧光标记探针来检测两个靠近的蛋白质分子之间的相互作用。 实验步骤如下: 1.细胞处理:首先,处理您要研究的细胞。您可以使用适用于您研究的细胞类型的特定处理方法。这可能包括对细胞进行激活...
2.使用最小体积的含DAPI的Duolink原位封固剂,用盖玻片盖好载玻片。 3.等待15分钟,然后在荧光或共聚焦显微镜中分析,使用至少20x物镜。 4.成像后,可将载玻片在黑暗中4°C下保存最多4天,或者在-20°C下保存最多6个月。
有关具体的产品建议,请参阅Duolink® PLA产品选择指南。简单来说,要运行用于荧光检测的Duolink® PLP实验,需要以下Duolink® PLA产品: 一、Duolink® PLA探针(一种PLUS和一种来自不同物种的MINUS,与您的一抗宿主物种相匹配)。每个试剂盒包括:
本实验方案描述了Duolink® PLA试剂用于组织和细胞样品中个体蛋白质、蛋白质修饰和蛋白质相互作用的明场检测、可视化和定量。如想了解Duolink® PLA技术，请下载我们的手册并查阅如何优化Duolink® 邻位连接测定以获得更多详细信息。如需更多实验方案，可参阅Duolink® PLA荧光实验方案和Duolink® PLA Probemaker...
本实验方案描述了Duolink® PLA试剂用于组织和细胞样品中个体蛋白质、蛋白质修饰和蛋白质相互作用的明场检测、可视化和定量。如想了解Duolink® PLA技术,请下载我们的手册并查阅如何优化Duolink® 邻位连接测定以获得更多详细信息。如需更多实验方案,可参阅Duolink® PLA荧光实验方案和Duolink® PLA Probemaker...
要成功地执行 Duolink® PLA 实验，实验方案中有一些必要的考虑因素需要正确地准备、设置和执行。Duolink® PLA 产品可用于荧光和明场。荧光 Duolink® PLA 试剂可用于显微镜和流式细胞术应用。更多内容请到默克生命科学官网查看：www.sigmaaldrich.cn 实验设计选择读出方法实验准备 要设计一个成功的Duolink® ...
在稳定完成后，PLA探针可4 °C保存在储存溶液中。只要是使用了PLUS PLA和MINUS PLA偶联的抗体，Duolink® PLA荧光实验方案或Duolink® PLA明场实验方案便可使用与Duolink® PLA探针组合或独立使用的Probemarker生成的抗体。请注意以下更改可能会影响到基于您PLA探针的实验：应使用Probemarker试剂盒中的PLA探针稀释...
荧光蛋白实验设计 要设计一个成功的Duolink® PLA实验,必须考虑很多因素。这些因素包括但不限于: · 确定蛋白质靶标和实验类型 · 选择样品(细胞或组织) · 设计您的读出方案 · 设计实验对照(技术和生物) 靶标识别 首先要确定的是目标蛋白靶标。是单一蛋白质表达,蛋白质与蛋白质的相互作用 (PPI),还是蛋白质...