dna分子原位杂交名词解释 原位杂交是基于DNA分子复制原理发展起来的一种技术,主要用于直接、简便地研究基因定位和表达。原位杂交的原理是两条核苷酸单链片段在适宜的条件下能通过氢键结合,形成DNA-DNA、DNA-RNA或RNA-RNA双键分子。这种技术利用带有标记(如放射性同位素或非放射性物质,如荧光素生物素、地高辛等)的DNA或...
将组织块入30%蔗糖/0.1M PBS液(4℃),1-2天后冰冻切片,将切片裱贴于原位杂交专用玻片上,切片厚度为15-20μm。 (二)探针制备与检测(定量): 1. 随机引物制备cDNA核酸探针以DIG DNA 标记检测试剂盒为例: (1)探针制备: ①模板DNA(0.5-3 μg) 15 μl,100℃变性10 min,冰浴5 min。 ②在冰浴中加:He...
原位杂交组织(或细胞)化学(InsituHybridizationHistochemistry,ISHH)简称原位杂交(InSituHybridization),属于固相分子杂交的范畴,它是用标记的DNA或RNA为探针,在原位检测组织细胞内特定核酸序列的方法。根据所用探针和靶核酸的不同,原位杂交可分为DNA-DNA杂交,DNA-RNA杂交和RNA-RNA杂交三类。根据探针的标记物是否直接被检...
将组织块入30%蔗糖/0.1M PBS液(4℃),1-2天后冰冻切片,将切片裱贴于原位杂交专用玻片上,切片厚度为15-20μm。 (二)探针制备与检测(定量): 1. 随机引物制备cDNA核酸探针以DIG DNA 标记检测试剂盒为例: (1)探针制备: ①模板DNA(0.5-3 μg) 15 μl,100℃变性10 min,冰浴5 min。 ②在冰浴中加:He...
Southern杂交步骤 Southern杂交可用来检测经限制性内切酶切割后的DNA片段中是否存在与探针同源的序列,它包括下列步骤:(1) 酶切DNA, 凝胶电泳分离各酶切片段,然后使DNA原位变性。(2) 将DNA片段转移到固体支持物(硝酸纤维素滤膜或尼龙膜)上。(3) 预杂交滤膜,掩盖滤膜上非特异性位点。(4) 让探针与 2022-04-07 ...
摘要:分枝DNA原位杂交(Branched DNA In Situ Hybridization,bDNA ISH)是新近发展起来的一项应用分枝DNA分析方法的原位杂交技术,可在组织和细胞水平上对特异基因进行亚细胞定位和一定水平的定量分析.该技术具有很高的灵敏度和特异性,不仅用于病毒DNA或RNA的检测,也可用于检测细胞内基因的表达水平,具有广阔的应用前景....
原位杂交可以用于检测DNA、RNA、蛋白质,都可以。检测DNA的叫southern杂交,检测蛋白的叫Western杂交、检测...
原位杂交组织(或细胞)化学,简称原位杂交(In Situ Hybridization,ISH),它是运用已知碱基序列并带有标记物的核酸探针与组织细胞中待测的核酸按碱基配对的原则进行特异性结合,形成杂交体,然后再运用与标记物相应的显示或检测系统,通过组织化学或免疫细胞化学等方法在核酸原有的位置进行细胞内核酸(DNA、RNA)定位的一种检测...
原位杂交组织(或细胞) 化学 (In situ Hybridization Histochemistry, ISHH) 简称原位杂交(In Situ Hybridization), 属于固相分子杂交的范畴, 它是用标记的 DNA 或 RNA 为探针, 在原位检测组织细胞内特定核酸序列的方法。 根据所用探针和靶核酸的不同, 原位杂交可分为 DNA-DNA 杂交, DNA-RNA 杂交和 RNA-RNA...
原位杂交组织(或细胞)化学 (In situ Hybridization Histochemistry,ISHH) 简称原位杂交(In Situ Hybridization),属于固相分子杂交的范畴,它是用标记的DNA或RNA为探针,在原位检测组织细胞内特定核酸序列的方法。根据所用探针和靶核酸的不同,原位杂交可分为DNA-DNA杂交,DNA-RNA杂交和RNA-RNA杂交三类。