DNA Pull down实验是一种用于研究DNA与蛋白质相互作用的体外实验方法，旨在从复杂的蛋白质混合物（如细胞裂解液）中捕获能够与特定DNA序列结合的蛋白质。通过该实验，可以研究DNA结合蛋白的种类及其调控功能，常用于研究转录因子、DNA修复蛋白等DNA结合蛋白。DNA Pull down 实验的基本步骤 1. DNA探针的设计和标记：设计...
DNA Pull Down是一种用于研究蛋白质与DNA之间相互作用的实验方法。其原理基于蛋白质与特定DNA序列之间的亲和性,通过特定的DNA探针捕获与其结合的蛋白质,从而实现对蛋白质-DNA复合物的富集和分析。 技术步骤 探针设计及标记: 采用基因组DNA做模板,经PCR扩增启动子片段。 探针经过脱硫生物素标记,以便与链霉亲和素磁珠结...
图 DNA pull-down MS技术鉴定与CCRM1-1结合的转录因子。（a）SDS-PAGE和银染色显示以CCRM1-1为探针的DNA拉下捕获的蛋白质；（b）通过DNA pull-down MS鉴定的与CCRM1-1结合的蛋白质成分；（c）基于PLACE数据库预测鉴定出的TF与CCRM1-1中顺式作用元件结合的基序；（d）基于小麦转录组数据库预测TF编码基因的...
DNA pull-down是体外研究DNA与蛋白互作的有力工具。该技术将生物素标记的DNA片段结合在链霉亲和素磁珠上,再与细胞的核蛋白孵育,纯化出与DNA片段互作的蛋白,洗涤洗脱得到的蛋白产物,做western-blot检测特定蛋白是否与靶DNA片段结合;做质谱鉴定即可筛选出与DNA片段可能互作的蛋白信息(如具体某个或某些转录因子/组蛋白/...
DNA pulldown 技术利用生物素标记的 DNA 作为诱饵分子,富集 DNA 结合 蛋白(转录因子、共调节因子、DNA 修复酶等)的实验技术。DNA pulldown 技 术是使生物素标记的 DNA 探针与细胞全蛋白提取液孵育,形成 DNA-蛋白质复 合物。该复合物可被链霉亲和素标记的磁珠结合并分离
1 Control Pull-down溶液 Ovis aries 2 sample Pull-down溶液 Ovis aries (2)检测过程 略 (3)检测结果 样品名称 Control sample 差异蛋白 Protein Group 230 327 132 7、生物信息学分析 针对实验组扣除对照组后的132个差异蛋白进行生物信息学分析(GO、KEGG pathway、String)。 (1)GO分析 根据分类结果,对包含目...
DNA pull-down实验首先针对靶标区域设计特异性DNA探针,探针经过脱硫生物素标记,跟偶联在磁珠上的链霉亲和素结合;细胞核提取物与磁珠-DNA探针孵育,作用蛋白质分子可以和DNA探针特异性结合;纯化出与靶DNA片段结合的蛋白复合体,经过洗涤可以将非特异性结合蛋白质去除;最后,经洗脱液洗脱,得到目的DNA探针-蛋白质复合物,再...
DNA 下拉实验从设计用于目标区域的 DNA 探针开始，该探针用脱硫生物素标记，并与与磁珠偶联的链霉亲和素结合。 细胞核提取物与珠子-DNA 探针一起孵育以纯化与目标 DNA 片段结合的蛋白质复合物，然后将其洗脱以获得 DNA 片段的结合蛋白质。 DNA pull down实验技术流程—辉骏生物 DNA pull down实验应用—辉骏生物 ...
在前面的文章中我们和大家一起学习了RNA pull-down这种实验技术,好学且好奇心强的小编又很快发现一种和它挺像的叫做DNA pull-down的新技术,再一起来看看吧。 一、原理概述 DNA pull-down是体外研究DNA与蛋白互作的有力工具。体外制备生物素标记的靶DNA系列,使其与待测蛋白液孵育,形成“生物素化DNA-蛋白质”复...
DNA Pull down实验是用脱硫生物素标记特异性DNA探针,脱硫生物素探针可以和偶联在磁珠上的链霉亲和素亲和结合。提取物与磁珠-DNA探针孵育,作用蛋白质分子可以和DNA探针特异性结合;经过洗涤可以将非特异性结合蛋白质去除;用 Western Blot或质谱对产物进行检测分析。