1. 转录因子研究：DNA Pull down 实验可用于鉴定能够结合特定基因启动子区域的转录因子，从而帮助理解基因表达调控的机制。2. DNA结合蛋白的鉴定：通过DNA Pull down，可以从复杂的蛋白质混合物中分离出特异性结合某个DNA序列的蛋白质，鉴定其生物学功能。3. 药物筛选：可以用于筛选能够抑制或促进蛋白质与DNA结合的小...
2. DNA pull down的技术流程 体外合成生物素标记的DNA片段→提取核蛋白(或总蛋白)→孵育→洗涤、洗脱互作蛋白→WB检测或质谱鉴定。 3. 适用范围 动物、细胞、植物组织、原生质体均可。 4. 客户提供 ①启动子序列(200-500bp为宜) ② 细胞/原生质体提供10的7次方,植物/动物组织提供1g以上 ③ 菌体0.5g以上 5...
DNA 下拉实验从设计用于目标区域的 DNA 探针开始，该探针用脱硫生物素标记，并与与磁珠偶联的链霉亲和素结合。 细胞核提取物与珠子-DNA 探针一起孵育以纯化与目标 DNA 片段结合的蛋白质复合物，然后将其洗脱以获得 DNA 片段的结合蛋白质。 DNA pull down实验技术流程—辉骏生物 DNA pull down实验应用—辉骏生物 ...
图 DNA pull-down MS技术鉴定与CCRM1-1结合的转录因子。（a）SDS-PAGE和银染色显示以CCRM1-1为探针的DNA拉下捕获的蛋白质；（b）通过DNA pull-down MS鉴定的与CCRM1-1结合的蛋白质成分；（c）基于PLACE数据库预测鉴定出的TF与CCRM1-1中顺式作用元件结合的基序；（d）基于小麦转录组数据库预测TF编码基因的...
本文以案例为基础,详细介绍了DNA pull down实验的流程,包括实验所需的仪器试剂、实验方法及实验结果,仅供参考。 试剂和耗材样品: 采用PCR制备探针 引物序列:F:5' CTATCCGGCCCAAGCTTT 3'R:5' AATAATTCACCTTGGTGTAAC 3'(728 bp) PCR反应体系如下: ...
大家好,今天普拉特泽生物跟大家一起看的是DNA pulldown实验操作步骤。DNA pull down是研究DNA和蛋白质互做关系的非常重要的实验,实验步骤由普拉特泽生物分析检测平台技术总结分享,欢迎科研实验人员联系互相交流。 1.探针设计及标记 ① 采用基因组DNA做模板,经PCR扩增启动子片段; ...
(3)加入1ml Protein dilution buffer,重悬磁珠,置于磁力架上静置1min,弃上清,该步骤重复5次。 五、洗脱复合物 (1)对照管和实验管均加入100µL Elution buffer,混匀后沸水浴8-10min,置于磁力架上静置2min,取上清到新的EP管中,即为pull down产物,标记为对照组和实验组,2管各加入20µL 6× Loading buffe...
一、DNA pull-down简介 DNA pull-down技术是一种用于研究蛋白质与DNA之间相互作用的实验方法。其原理基于蛋白质与特定DNA序列之间的亲和性,通过特定的DNA探针捕获与其结合的蛋白质,从而实现对蛋白质-DNA复合物的富集和分析。 二、DNA pull down实验步骤
DNA pull-down实验是通过设计特异性DNA探针，利用生物素标记并结合链霉亲和素磁珠，将目标蛋白质与靶DNA片段结合的实验技术。实验流程主要包括探针设计与标记、Pull down操作和蛋白质检测三个关键步骤。探针设计与标记：首先，使用基因组DNA为模板，通过PCR扩增启动子片段，将其克隆至载体并进行序列鉴定。随后...
DNA pulldown 技术利用生物素标记的 DNA 作为诱饵分子,富集 DNA 结合 蛋白(转录因子、共调节因子、DNA 修复酶等)的实验技术。DNA pulldown 技 术是使生物素标记的 DNA 探针与细胞全蛋白提取液孵育,形成 DNA-蛋白质复 合物。该复合物可被链霉亲和素标记的磁珠结合并分离