DNA Pull Down是一种用于研究蛋白质与DNA之间相互作用的实验方法。其原理基于蛋白质与特定DNA序列之间的亲和性,通过特定的DNA探针捕获与其结合的蛋白质,从而实现对蛋白质-DNA复合物的富集和分析。 技术步骤 探针设计及标记: 采用基因组DNA做模板,经PCR扩增启动子片段。 探针经过脱硫生物素标记,以便与链霉亲和素磁珠结...
DNA Pull down实验是一种用于研究DNA与蛋白质相互作用的体外实验方法，旨在从复杂的蛋白质混合物（如细胞裂解液）中捕获能够与特定DNA序列结合的蛋白质。通过该实验，可以研究DNA结合蛋白的种类及其调控功能，常用于研究转录因子、DNA修复蛋白等DNA结合蛋白。DNA Pull down 实验的基本步骤 1. DNA探针的设计和标记：设计...
DNA pull-down WB制备DNA探针探针电泳图25工作日1、实验样本2、含有目标DNA序列的质粒模板及测序文件3、待测蛋白抗体4、实验信息表(样本信息、抗体信息、目标DNA和待测蛋白序列) Western blot检测待测样本中的待测蛋白Western blot检测图 DNA pull down捕获目标DNA片段及其结合蛋白(2组:实验组、对照组)RNA pull do...
说明DNA-pull down MS技术为分析Glu-1表达的调控机制提供了大量可参考研究的基因，为改良小麦遗传育种提供了大量价值基因。二、实验方法 以小麦开花后10天的小麦种子为实验对象提取蛋白，以CCRM1-1为探针并使用生物素标签进行标记，进行DNApull-down，捕获的蛋白进行SDS-PAGE分离，酶解后利用LC-MS对结合探针的蛋白进行...
DNA pull-down实验首先针对靶标区域设计特异性DNA探针,探针经过脱硫生物素标记,跟偶联在磁珠上的链霉亲和素结合;细胞核提取物与磁珠-DNA探针孵育,作用蛋白质分子可以和DNA探针特异性结合;纯化出与靶DNA片段结合的蛋白复合体,经过洗涤可以将非特异性结合蛋白质去除;最后,经洗脱液洗脱,得到目的DNA探针-蛋白质复合物,再...
本文以案例为基础,详细介绍了DNA pull down实验的流程,包括实验所需的仪器试剂、实验方法及实验结果,仅供参考。 试剂和耗材样品: 采用PCR制备探针 引物序列:F:5' CTATCCGGCCCAAGCTTT 3'R:5' AATAATTCACCTTGGTGTAAC 3'(728 bp) PCR反应体系如下: ...
组织样本:3g (1个探针需要1g新鲜组织) 细胞样本:2.7ⅹ107 微生物:4ⅹ1010 交付结果项目周期-工作日 1. DNA探针电泳图 2. 探针标记效率结果 3. 核蛋白银染结果 4. DNA pull down银染结果 5. 质谱检测结果 6. DNA Pull Down分析报告 探针制备:10天 ...
DNA pull-down实验首先针对靶标区域设计特异性DNA探针,探针经过脱硫生物素标记,跟偶联在磁珠上的链霉亲和素结合;细胞核提取物与磁珠-DNA探针孵育,作用蛋白质分子可以和DNA探针特异性结合;纯化出与靶DNA片段结合的蛋白复合体,经过洗涤可...
DNA Pull down实验是用脱硫生物素标记特异性DNA探针，脱硫生物素探针可以和偶联在磁珠上的链霉亲和素亲和结合。提取物与磁珠-DNA探针孵育，作用蛋白质分子可以和DNA探针特异性结合；经过洗涤可以将非特异性结合蛋白质去除；用 Western Blot或质谱对产物进行检测分析。实验流程图：2、 DNA pull-down技术应用 DNA pull-...