DNA Pull down实验是用脱硫生物素标记特异性DNA探针,脱硫生物素探针可以和偶联在磁珠上的链霉亲和素亲和结合。提取物与磁珠-DNA探针孵育,作用蛋白质分子可以和DNA探针特异性结合;经过洗涤可以将非特异性结合蛋白质去除;用 Western Blot或质谱对产物进行检测分析。 实验流程图: 2、DNA pull-down技术应用 DNA pull-dow...
DNA Pull down实验是一种用于研究DNA与蛋白质相互作用的体外实验方法，旨在从复杂的蛋白质混合物（如细胞裂解液）中捕获能够与特定DNA序列结合的蛋白质。通过该实验，可以研究DNA结合蛋白的种类及其调控功能，常用于研究转录因子、DNA修复蛋白等DNA结合蛋白。DNA Pull down 实验的基本步骤 1. DNA探针的设计和标记：设计...
DNA pull-down是体外研究DNA与蛋白互作的有力工具。该技术将生物素标记的DNA片段结合在链霉亲和素磁珠上,再与细胞的核蛋白孵育,纯化出与DNA片段互作的蛋白,洗涤洗脱得到的蛋白产物,做western-blot检测特定蛋白是否与靶DNA片段结合;做质谱鉴定即可筛选出与DNA片段可能互作的蛋白信息(如具体某个或某些转录因子/组蛋白/...
以小麦开花后10天的小麦种子为实验对象提取蛋白，以CCRM1-1为探针并使用生物素标签进行标记，进行DNApull-down，捕获的蛋白进行SDS-PAGE分离，酶解后利用LC-MS对结合探针的蛋白进行鉴定。三、研究结果 通过LC-MS共鉴定出385个蛋白，其中包含118个可能与CCRM1-1结合的转录效应子，118个转录效应子中包含31个转录因子。
DNA Pull down技术原理 先将含脱硫生物素的DNA pull down探针结合到链霉亲和素Beads上,再将DNA-Beads和细胞裂解液孵育,这样DNA结合蛋白便一起吸附在Beads上。洗涤掉未结合的蛋白后,再用洗脱液将DNA结合蛋白从Beads洗脱下来,得到DNA pull down产物。DNA-protein复合物既可以做western-blot检测特定蛋白是否与靶DNA片段...
DNA Pull-down技术是体外研究DNA与蛋白互作的有力工具。背景说明 针对目标区域体外制备脱硫生物素标记的特异性DNA探针，使其与待测蛋白液孵育，可与偶联在磁珠上的链霉亲和素结合，形成“生物素化DNA-蛋白质”复合物。生物素与链霉亲和素间的作用是目前已知强度最高的非共价作用，采用链霉亲和素磁珠将靶DNA及其结合...
DNA pull-down实验首先针对靶标区域设计特异性DNA探针,探针经过脱硫生物素标记,跟偶联在磁珠上的链霉亲和素结合;细胞核提取物与磁珠-DNA探针孵育,作用蛋白质分子可以和DNA探针特异性结合;纯化出与靶DNA片段结合的蛋白复合体,经过洗涤可以将非特异性结合蛋白质去除;最后,经洗脱液洗脱,得到目的DNA探针-蛋白质复合物,再...
DNA Pull down实验是用脱硫生物素标记特异性DNA探针，脱硫生物素探针可以和偶联在磁珠上的链霉亲和素亲和结合。提取物与磁珠-DNA探针孵育，作用蛋白质分子可以和DNA探针特异性结合；经过洗涤可以将非特异性结合蛋白质去除；用 Western Blot或质谱对产物进行检测分析。实验流程图：2、 DNA pull-down技术应用 DNA pull-...
DNA Pull down实验是用脱硫生物素标记特异性DNA探针,脱硫生物素探针可以和偶联在磁珠上的链霉亲和素亲和结合。提取物与磁珠-DNA探针孵育,作用蛋白质分子可以和DNA探针特异性结合;经过洗涤可以将非特异性结合蛋白质去除;用 Western Blot或质谱对产物进行检测分析。
1、 实验简介DNA Pull down实验是用脱硫生物素标记特异性DNA探针,脱硫生物素探针可以和偶联在磁珠上的链霉亲和素亲和结合。提取物与磁珠-DNA探针孵育,作用蛋白质分子可以和DNA探针特异性结合;经过洗涤可以将非特异性结合蛋白质去除;用 Western Blot或质谱对产物进行检测分析。实验流程图: 2、 DNA pull-down技术应用...