12. Xiao, R., Wang, S., Han, R., Li, Z., Gabel, C., Mukherjee, I.A., and Chang, L. (2021). Structural basis of target DNA recognition by CRISPR-Cas12k for RNA-guided DNA transposition.Mol Cell81, 4457...
最近,带有功能发散效应器的新型V型系统被发现,这可能会扩展CRISPR-Cas工具箱。其中,V-C型系统的特征效应子Cas12c(原名C2c3)是一种双RNA引导的DNA内切酶,其大小与常用的Cas9和Cas12a变体相似。与其他V型效应子类似,Cas12c在其C端区域...
Clustered regularly interspaced short palindromic repeats (CRISPR)–Cas12a is widely used for genome editing and diagnostics, so it is important to understand how RNA-guided DNA recognition activates the cleavage of the target strand (TS) following non-target-strand (NTS) cleavage. Here we used si...
The CRISPR-Cas12a system has revolutionized nucleic acid testing (NAT) with its rapid and precise capabilities, yet it traditionally required RNA pre-amplification. Here we develop rapid fluorescence and lateral flow NAT assays utilizing a split Cas12a system (SCas12a), consisting of a Cas12a enz...
该专利涵盖辉大基因自主开发的hfCas12Max高编辑活性核酸酶,包含hfCas12Max的CRISPR-Cas12i系统(Cas12Max系统),及其在DNA编辑方面的使用。此前,该系统于2023年5月获得美国发明专利授权。 CRISPR-Cas12系统是在进化和分类学方面都区别于CRISPR-Cas9的一类新兴CRISPR系统,其使用不受限于CRISPR-Cas9专利。目前,辉大基因...
2023年5月16日,由辉大基因科学家团队自主开发的新型DNA编辑系统CRISPR-Cas12i(Cas12Max®)的美国发明专利US11,649,444B1,通过专利快速审查通道,在短短9个月内正式获得美国专利商标局(USPTO)授权,实现了中国首个CRISPR-Cas12i系统底层专利的海外布局突破。该底层专利涵盖辉大基因自主开发的多个新型Cas12i蛋白及其...
CRISPR-Cas系统是细菌和古生菌抵抗病毒入侵的一种适应性免疫系统,其中,II型Cas9和V型Cas12系统已被开发为基因编辑工具,广泛应用于基础研究、作物育种、核酸检测、基因治疗等领域1,2。相比于II型Cas9系统,V型Cas12系统具有更加多样性的V-A到V-K核酸内切酶亚型3,其中V-I Cas12 (Cas12i)具有尺寸更小、可自加工...
2022年9月27日,上海科技大学 季泉江 教授团队在 Cell Reports 发表了题为: Guide RNA engineering enables efficient CRISPR editing with a miniature Syntrophomonas palmitatica Cas12f1 nuclease 的研究论文。 该论文报道了来自棕榈酸互营单胞菌 (Syntrophomonas palmitatica) 的Cas12f1(SpaCas12f1) 的生化特征及其...
基于CRISPR-Cas系统的特异性切割目标片段的特点,肿瘤正确治疗基因检测将CRISPR-Cas9和传统PCR结合起来,实现了对NSCLC中EGFR第19外显子中贼常见的缺失突变的检测。他们为缺失片段设计了一个目标单链向导RNA (sgRNA),并在sgRNA的指导下,Cas9与目标序列结合,实现了对野生序列的特异性切割。突变序列没有受到影响,并在PCR...
CRISPR/Cas9技术主要过程是crRNA结合到Cas9,Cas9核酸酶的构象发生改变,产生一条能通道,让DNA更容易结合。Cas9/crRNA复合体能够识别PAM(5'-NGG)位点导致DNA解旋,使crRNA找到PAM位点相邻的DNA互补链。当Cas9结合到PAM位点相邻的,与crRNA互补的DNA序列上,REC叶内部的桥螺旋和靶DNA形成RNA-DNA 异源双链结构。PAM位点的...