荧光原位杂交(FluorescenU in siUu hybridizaUion, FISH)是将经荧光素标记的寡核酸探针与变性后的染色体、细胞或组织中的核酸按照碱基互补配对原则进行杂交,再经变性、退火、复性、洗涤后,形成靶DNA或RNA与核酸探针的杂交体,最后,在荧光显微镜下显影,从而对待测DNA或RNA进行定性和定位分析,具有实验周期短、灵敏度高...
荧光原位杂交(fluorescence in situ hybridization,FISH)是利用荧光标记的特异核酸探针与细胞内相应的靶DNA分子或RNA分子杂交,通过在荧光显微镜或共聚焦激光扫描仪下观察荧光信号,来确定与特异性探针杂交后被染色的细胞或细胞器的形态和分布,或者是结合了荧光探针的DNA区域或RNA分子在染色体或其他细胞器中的定位。可以用直...
DNA探针是一段特定序列的DNA片段,它会与目标DNA序列互补配对。在FISH实验中,DNA探针先用荧光染料标记,然后与待测DNA进行杂交反应。通过荧光显微镜观察,可以看到荧光信号指示目标DNA的存在和位置。 另外一种常用的DNA染色方法是凝胶电泳染色。凝胶电泳是一种将DNA分子按照大小进行分离的技术。在凝胶电泳染色中,DNA样品...
7q探针,主要是以红色荧光分子标记20q12 DNA区域为探针,约352Kb,使其与骨髓间期细胞细胞核内的基因序列杂交互补,因此具有极高的特异性。如图所示 临床意义 对于具有治疗指征的患者根据FISH结果分层,选择不同的治疗方案。20q出现缺失见于MPD/MDS(4%)/AML(1%)等疾病中,预后较好,其中20q12微小区域缺失见于MPD和MDS中...
TERC基因扩增探针,主要定位于人染色体3q26.3处,长度为450bp,其编码的蛋白质相对分子量为380000。该探针主要以采用橘红色荧光分子标记TERC基因扩增区域,采用绿色荧光分子标记3号染色体着丝粒区域(CEP3)。如图所示 临床意义 利用FISH检测TERC扩增,可以提供一种具有更高敏感性和特异性的临床检测方法。TERC基因扩增检测在检测...
P53基因探针 疾病背景介绍 p53基因是一种肿瘤抑制基因(tumor suppressor gene),是最早发现的抑癌基因之一。该基因编码一种分子量为43.7KDa的蛋白质,但因蛋白条带出现在Marker所示53KDa处,命名为P53。p53肿瘤抑制基因位于17号染色体上,并且编码393个氨基酸蛋白。p53基因突变是人类癌症中zui常见的特异性基因突变之一,是...
FISH属于非放射性标记,其优点在于简便,快速,其敏感性可与放射性同位素标记核酸探针相等。不少实验室报告应用FISH(2～5kbp探针)可成功地达到单个拷贝(copy)的特异性定位。 2.荧光标记DNA探针应用于ISHH中的基本原则(Barbara Traok和 Dan Pinkel 1990) (1)首先应使组织或染色体中靶核苷酸高温加热变性解离为单链DNA...
前者更多用来封闭探针上的重复序列，后者用来竞争结合掉容易粘探针序列的非特异位点
FISH的探针设计原则。 [0003]荧光原位杂交(Fluorescence in situ hybridization,FISH)的基本原理是用荧 光标记的单链核酸为探针,按照碱基互补配对的原则,与待检材料中的核酸(RNA或DNA)进 行特异性结合,形成可被检测的杂交双链核酸,从而原位显示RNA或DNA的表达特征。FISH的 一般流程为样本制备→探针制备→探针标记→...